F-605 Токоизмерительные клещи
Выберите категорию:
Все Многофункциональный комплекс RAPTOR Трассоискатели » Трассоискатели RIDGID »» Трассоискатели Ridgid серии SR »» Трассопоисковые комплекты RIDGID »» Трассопоисковые генераторы RIDGID » Трассоискатели Sewerin » Трассоискатели Техно Ас » Трассоискатели Радио-Сервис » Трассоискатели Radiodetection » Трассоискатели с GPS » Трассоискатели кабельных линий Течеискатели » Корреляционные течеискатели » Акустические течеискатели » Регистраторы шумов утечки Телеинспекция трубопроводов » Робототехнические комплексы » Краб-Роботы » Проталкиваемые камеры » Видеоэндоскопы Ультразвуковая диагностика Электроэнергетическое оборудование » Высоковольтные испытательные установки »» Установки AC/DC »» Высоковольтные СНЧ установки »» Испытания изоляционных масел » TD Измерители тангенса угла диэлектрических потерь » PD Системы измерения частичных разрядов для установок B2 HVA » Диагностика трансформаторов »» Комплексная проверка »» Коэффициент трансформации »» Измерение сопротивления обмоток »» Мосты переменного тока, измерение tan delta » Проверка устройств РЗиА » Тестирование аккумуляторных батарей » Прогрузка первичным током »» Устройства прогрузки автоматических выключателей »» Нагрузочные трансформаторы » Тестирование высоковольтных выключателей » Определение мест повреждения кабеля »» Прожигающие установки »» Генераторы высоковольтных импульсов »» Рефлектометры »» Мобильные системы для предварительной и точной локации »» Генераторы звуковой частоты »» Испытание и определение мест повреждений в оболочке »» Трассировка кабельных линий и локация мест повреждений »» Выбор кабеля из пучка » Индикаторы короткого замыкания ИКЗ Электроизмерительное оборудование » Измерение параметров электроизоляции » Омметры, Микромметры » Анализаторы качества электроэнергии » Измерение параметров петли короткого замыкания » Измерение времени и тока отключения УЗО » Измерение параметров заземляющих устройств » Многофункциональные тестеры » Клещи электроизмерительные » Измерители параметров электробезопасности » Вольтамперфазометры » Мультиметры » Измерители RLC (сопротивления, индуктивности, емкости) » Лабораторное оборудование »» Генераторы импульсов и сигналов »» Контроль состояния изоляторов Средства релейной защиты и автоматики Тепловизоры » Тепловизоры FLIR » Тепловизоры FLUKE » Тепловизоры Testo » Тепловизоры Sonel Метрологическое оборудование Инструмент для кабельных линий » Многофункциональный электроинструмент RE-60 » Ручные кабелерезы с трещоткой » Ручные рычажные кабелерезы » Ручной гидравлический инструмент для обжима
Производитель:
ВсеB-2BatcamBAURBEWARDChauvin ArnouxCrowconCTRL SystemsEndocontrolEuroSMC, S. A.FLIRFlukeGW InstekGW Instek Good Will InstrumentKEPKilovolt PrueftechnikMEGGERMetrelRadiodetectionRAUSCHRIDGIDSeba KMTSEWSewerin GmbHSM Instruments Inc.SonelTesto AGVanguardWIKAАКИПАНГСТРЕМ ИПАнтраксБрисБэттери Сервис ГруппИнтеринжИнтерМиксМарс-ЭнергоМегомметрМолнияНПФ РадиусОАО «Гамма»ОлтестРадио СервисРадиус АвтоматикаРоссияСТЭЛЛТехно АсТехно-АсХарьковЭнергоПрибор
Клещи токоизмерительные: как правильно пользоваться
Среди инструментов, необходимых для работы любому электромонтажнику, не зависимо от того, в какой области проводит он свою работу, клещи токоизмерительные являются одним из самых необходимых инструментов, используемых каждый день.
Именно с помощью этого инструмента выполняются измерения показателей переменного тока без разрыва цепи и другие важные параметры электрических сетей. Важной особенностью данного инструмента является то, что для измерения заданных параметров нет необходимости подключаться непосредственно к токоведущим проводникам, достаточно лишь ввести провода в изоляции во внутренне пространство, между клещами инструмента.
По какому принципу работает инструмент
Прежде чем поговорить о том, как пользоваться токоизмерительными клещами, необходимо понять принцип их работы. В принцип работы заложен закон взаимоиндукции. Работа токоизмерительных клещей напоминает работу трансформатора. Измеряемый проводник выполняет функцию первичной обмотки и вокруг него формируется переменное магнитное поле. Клещи прибора выполняют функцию вторичной обмотке трансформатора и согласно закона взаимоиндукции на них индуцируется ток. Исходя из показателей этого тока, рассчитываются основные измеряемые технические параметры тока.
Инструкция по применению
Практически все токовые клещи, присутствующие сегодня на рынке, являются цифровыми. Давайте подробно рассмотрим, как пользоваться токоизмерительными клещами.
Цифровые клещи М266
Прибор является профессиональным. Состоит из цифрового табло на жидких кристаллах, на котором отражаются все измеряемые показатели, кругового поворотного переключателя. На его шкале нанесены основные параметры пределов измерений и их значения в нужном диапазоне. Основной рабочей частью прибора являются сами клещи (клещи — трансформатор).
На рисунке выше изображена панель управления цифровыми токоизмерительными клещами М266.
А на рисунке ниже — поставляемая комплектация этого прибора.
Прибор имеет пределы измерений по току – 20А, 200А и 1000А
Цифровые измерительные клещи М266 снабжены мультиметром с щупами. С их помощью можно проводить измерение напряжения до 1000 Вольт постоянного и 750 вольт переменного тока. Прибором можно проверить исправность полупроводниковых диодов, использовать прибор для прозвонки электрических цепей, измерять температуру.
Про токоизмерительные клещи M266 видео смотрите ниже:
Аналоговые клещи Ц4501
Этот измерительный прибор использует для проведения замеров те же принципы физики, что и цифровые клещи, но его функциональность несколько ниже. Прибор имеет пределы измерений по току – 10А, 25А, 100А, 250А и 500А, по напряжению 30В и 600В, по сопротивлению 2кОм. Но он не может измерять сопротивление изоляции и температуру. По всем остальным показателям он не уступает цифровому прибору.
Как проводить измерения
Для того чтобы провести измерение цифровыми токоизмерительными клещами необходимо выполнить следующие операции:
- Включить прибор и выставить поворотный переключатель в нужный вам сектор предела измерений;
- Завести проводник между магнито-несущими трансформаторными клещами;
- Дождаться появления результатов измерения на табло.
Проводя работы по измерению напряжения и силы тока в электрических сетях с помощью измерительных токовых клещей необходимо помнить про следующие тонкости такой работы:
- В случае если параметры, выводимые на табло прибора не корректны – убедитесь в том, что правильно выбрали измерительный диапазон для работы с прибором. При проведении измерений со стрелочным прибором, стрелку может «зашкаливать»;
- Для того чтобы использование измерительного прибора дало максимально точные результаты рекомендуется воспользоваться следующим способом измерения: возьмите в клещи несколько витков измеряемого проводника (это надо делать, предварительно обесточив данный проводник и проверив отсутствие напряжения индикатором), а после подачи напряжения полученные результаты измерения поделите на количество витков, таким образом, полученный результат будет наиболее точно отражать реальный рабочий ток;
- Строго соблюдайте все меры безопасности при работе с цепями, находящимися под напряжением.
Что нужно помнить
Важно помнить, что все работы по построению и обслуживанию электрических сетей, а так же по проведению электротехнических измерений должны выполняться только специально обученным персоналом, имеющим все необходимые допуски и наряд на выполнение работ под напряжением. Соблюдайте правила электробезопасности, а именно: используйте обувь на резиновой подошве (диэлектрические калоши), применяйте резиновые диэлектрические перчатки, работайте с напарником.
Кроме того, избегайте касаний голыми частями тела токоведущих частей, не допускайте образования электрической дуги. Если вы не являетесь аттестованным специалистом, и работаете без напарника и наряда на выполнение работ – вы полностью перекладываете на себя всю ответственность за возможные повреждения и травмы, которые вы можете получить в процессе их выполнения.
Электричество опасно для жизни, важно помнить об этом, и соблюдать все меры безопасности. Особенно в том случае, когда речь идёт о проведении работ в щитовых. Ведь сила тока в них выше, чем в домашней сети, равно как и напряжение. Именно там и используются в основном токоизмерительные клещи. Не пренебрегайте возможностью обратиться за помощью к обученным специалистам, не рискуйте своей жизнью понапрасну.
В случае если вы всё-таки решили провести подобные работы самостоятельно – изучите видео, прочитайте внимательно инструкции, как пользоваться токовыми клещами, и только после этого, с соблюдением всех мер безопасности, приступайте к работам.
Как пользоваться токоизмерительными клещами видео смотрите ниже:
Токоизмерительные клещи это простой и современный прибор, позволяющий без труда получить все необходимые данные, не вступая в прямой контакт с электричеством. Особенно важно их использование в случаях линий с большой силой тока, где стандартные мультиметры не подойдут, из-за малого сечения измерительного проводника.
Однако никогда не забывайте об опасности, которую представляет собой для здоровья человека электрический ток. И если вы сомневаетесь в своей квалификации – не приближайтесь к электрическим сетям, распределительным щитам, и электромонтажным работам. Ценой ошибки здесь может оказаться жизнь. Берегите себя и пользуйтесь услугами профессионалов.
Как пользоваться клещи токоизмерительные. Клещи электроизмерительные цифровые КТ-1000А. Клещи цифровые электроизмерительные
Токоизмерительные клещи как пользоваться. Как пользоваться токовыми клещами
Клещи токоизмерительные представляют собой прибор, основным назначением которого является измерение электрического ток без разрыва электрической цепи и нарушения ее функционирования.
Дополнительно этот прибор способен измерять также напряжение, частоту, температуру (в некоторых моделях).
В соответствии с измеряемыми величинами делятся на амперметры, вольтметры, ваттметры, фазометры, ампервольтметры.
К самым распространенным относятся клещевые амперметры для измерения переменного тока, получившие название токоизмерительных клещей. С их помощью можно быстро измерить ток в проводнике, не разрывая и не отключая электрическую цепь. Электроизмерительные клещи могут применяться в электроустановках до 10000В.
О назначении многих электрических приборов и инструментов известно любому обывателю – все знают, зачем нужен паяльник или электрическая дрель. Но далеко не у каждого, даже не на каждом предприятии найдутся токоизмерительные клещи.
Несмотря на это, токовые клещи предназначены для широкого использования, просто очень многие не знают о существовании такого прибора и не умеют ним пользоваться.
Где применяются электроизмерительные клещи?
Клещи токоизмерительные могут стать незаменимым помощником как для бытовых потребителей, так и на предприятиях различных масштабов. С их помощью возможно:
- — определять фактическую нагрузку в сети. Чтобы определить нагрузку однофазной сети, осуществляется замер на вводном кабеле, полученное значение тока в амперах умножается на напряжение в сети и косинус угла между фазами (cos φ). Если отсутствует реактивная нагрузка (мощные индуктивные элементы, дроссели, двигатели), то последнее значение принимается равным единице (cos φ = 1).
- — для измерения мощности различных приборов. В случае возникновения необходимости измеряется сила тока участка цепи с подключенным потребителем. Мощность определяется по вышеописанной формуле.
- — для проверки функционирования приборов учета потребления электроэнергии, например, сверки показаний счетчиков с фактическим потреблением.
Конструкция и обозначения
В состав электроизмерительных клещей любой модификации входят следующие основные части: клещи-магнитопровод, переключатель диапазонов и функций, дисплей, выходные разъемы, кнопка фиксации измерений. В данной статье рассматриваются токовые клещи марки mastech M266 .
Переключатель может быть установлен в одно из положений режимов измерений:
- — DCV – постоянное напряжение;
- — ACV – переменное напряжение;
- — DCA – постоянный ток;
- — ACA – переменный ток;
- — Ω — сопротивление;
- — значок диода – проверка диодов;
- — значок сигнала – прозвонка с зуммером.
Три входных разъема прибора имеют защиту от перегрузки. При подключении прибора черный провод щупов подсоединяется к разъему «COM», а красный – к разъему «VΩ». Третий разъем, обозначенный как «EXT», применяется для подключения измерителя изоляции.
Порядок измерения тока
Переключатель пределов устанавливается в положение, соответствующее необходимому диапазону измерения переменного тока. Токовые клещи подключаются к измеряемому проводнику.
Если на дисплее наблюдается только значение «1», то необходимо переключатель пределов установить на более высокое значение, так как возникла перегрузка.
Порядок измерения напряжения
Красный провод щупа подсоединить к разъему «VΩ», черный – к «COM». Переключатель пределов установить в положение, соответствующее измеряемому диапазону.
Щупы подсоединить к измеряемой нагрузке или источнику напряжения. На экране прибора будет наблюдаться измеряемое напряжение, а также его полярность. Если на экране наблюдается только значение «1», то переключатель пределов необходимо переключить на более высокое значение, так как возникла перегрузка.
Порядок измерения сопротивления
Щупы прибора так же, как и при измерении напряжения. Переключатель диапазонов установить на диапазон «Ω». Если прибор используется для прозвонки, то переключатель нужно установить в соответствующее положение. Если сопротивление измеряемого участка схемы меньше 50 Ом, то будет звучать сигнал зуммера.
Электроизмерительные клещи – принципы работы
В работу простейших токоизмерительных клещей переменного тока положен принцип одновиткового трансформатора тока.
Его первичная обмотка представляет не что иное, как провод или шину, в которой измеряется ток. Вторичная обмотка, имеющая больше количество витков, намотана на разъемный магнитопровод и находится в самих клещах. К вторичной обмотке подключен амперметр.
Измерив ток, который протекает во вторичной обмотке с учетом известного коэффициента трансформации измерительного трансформатора, можно получить величину тока, измеряемую в проводнике.
not-parasite.ru
8 вспомогательных режимов для работы
Статьи
Цикл статей «Цифровые мультиметры и электроизмерительные клещи фирмы APPA»
А. А. Дедюхин, ЗАО «ПриСТ» |
Вступление
Фирма «АРРА» ведущий мировой производитель цифровых мультиметров и электроизмерительных клещей. Эта компания существует с 1989 года, но, не смотря на кажущуюся молодость, занимает второе место в мире по объему выпускаемой продукции, уступая только компании «Fluke». Компания АРРА обеспечивает 10% мировых продаж мультиметров и токовых клещей. Не секрет, что многие известные мировые производители измерительной техники, для обеспечения более полного ассортимента своей продукции, прибегают к помощи других производителей выпускающих продукцию под их марками. Так АРРА выпускает измерительные приборы для таких компаний, как «Tektronix», «GOOD WILL», «AVO», «METRIX» под их торговыми марками. В настоящий момент компания АРРА является активным участником программы «Это очень хорошо — произведено в Тайване», проводимой под эгидой правительства Тайваня. Цель этой акции — доказать, что продукция производства Тайваня может конкурировать на мировом рынке и мнение о не высоком качестве электронной продукции Тайваня, не соответствует действительности.
В нашей стране компания АРРА известна уже более 2 лет, под своей «родной» торговой маркой и успела завоевать уважение потребителей, благодаря, прежде всего, высоким метрологическим параметрам, высокой надежности и удачным инженерным разработкам выпускаемой ими продукции. В настоящее время компания выпускает более 35 моделей различных мультиметров и более 20 моделей электроизмерительных клещей.
Тщательный отбор элементной базы, применение новых СБИС, прецизионных сопротивлений позволило значительно снизить погрешности измерения и приблизить их по точностным характеристикам к лабораторным приборам. Применение надежного пластика для корпуса и переключателей, применение медно-бериллиевого сплава в подвижных контактах и золота для контактов на плате прибора, ударопрочных ЖКИ индикаторов, позволило значительно повысить механическую надежность продукции компании АРРА. Мультиметры выдерживают падение на бетонный пол с высоты до 3м, могут работать в условиях повышенной влажности (вплоть до погружения в воду), не боятся случайного воздействия высоких температур (например паяльника).
Для возможности использования своей продукции в сфере действия метрологического контроля и надзора копания АРРА трижды подавала заявки в Госстандарт РФ для проведения испытания с целью утверждения типа выпускаемой ими продукции. Испытания были проведены ВНИИФ ТРИ и Нижегородским ЦСМ. В настоящий момент большая часть средств измерения компании АРРА имеют сертификаты об утверждении типа и допущены к применению в РФ.
Компания АРРА выпускает и
prist.ru
35405-13: КТ-1000А Клещи электроизмерительные цифровые
Назначение
Клещи электроизмерительные цифровые КТ-1000А (далее клещи) предназначены для кратковременных измерений силы тока до 1000 А и напряжения до 1000 В в сетях постоянного и переменного (частотой 50 Гц) тока, распределительных устройствах воздушных линиях электропередачи без разрыва токовой цепи.
Клещи могут быть использованы во всех отраслях промышленности, энергетики, сельского хозяйства и быту.
Описание
Принцип работы клещей основан на определении величины напряженности электромагнитного поля, создаваемого вокруг проводника посредством совокупности специализированных температурно-компенсированных датчиков, распределенных вокруг токоведущего проводника по осям вилки клещей, что позволяет определять величины силы тока независимо от оси и угла расположения проводника в пространстве вилки клещей.
Индикация измеряемой величины и режима работы (переменное, постоянное, ток или напряжение) осуществляется посредством цифрового табло. В комплекте с изолирующей многофункциональной четырехзвенной сборной штангой длиной 6,6 м позволяют определять величину тока на линиях электропередач от 0,4 до 10 кВ без подъема на опору ВЛ, непосредственно с поверхности земли.
Таблица 1 — Основные метрологические и технические характеристики приборов.
Наименование характеристики |
Значение |
Диапазон измерения силы переменного тока, А |
от 0 до 1000 |
Диапазон измерения силы постоянного тока, А |
от 20 до 1000 |
Пределы допускаемой основной приведенной погрешности при Измерении силы переменного и постоянного тока, % |
1,5 |
Диапазон измерения напряжения переменного тока, В |
от 0 до 1000 |
Диапазон измерения напряжения постоянного тока, В |
от 10 до 1000 |
Пределы допускаемой относительной погрешности при измерении напряжения переменного и постоянного тока, % |
1 |
Климатическое исполнение и категория размещения по ГОСТ 15150 |
У1 |
Питание (от двух последовательно соединенных литиевых элементов типа «GR 123 А»), В |
2×3 |
Ток потребления клещей, мА |
30 |
Масса*, кг, не более |
0,4 |
Габаритные размеры*, мм, не более |
430x55x60 |
* — комплект для линий электропередач 0,4 кВ. Знак утверждения типа
Знак утверждения типа наносится методом трафаретной печати на корпус СИ и типографским способом на титульный лист паспорта.
Комплектность
Таблица 3 — Комплектность
№ п/п |
Наименование изделия |
Кол-во |
1 |
Клещи КТ-1000А |
1 |
2 |
Электрод с соединительным проводом и штекером |
1 |
3 |
4-х звенная сборная штанга Ш0-10-4-6.6, L= 6,6 м* |
1 |
4 |
Чехол |
1 |
5 |
Паспорт (Инструкция в составе паспорта) |
1 |
* — поставляется отдельно по заказу потребителя |
Поверка
осуществляется по документу 37511563. k от 0,001 до 1000 В
до 100В ± (40U + 500) мкВ; до 1000В ± (0,04U + 5) мВ
Наименование средства поверки |
Диапазон измерений |
Погрешность |
Прибор для поверки вольтметров В1-9 с блоком Я1В-22 |
ивых от 0,001 до 1000 В |
от 0,02 до 0,1 % |
Установка поверочная У 300 |
1пост от 0 до 30 А; 1перем от 0 до 10 А |
Кл. т |
xn--90adflmiialse2m.xn--p1ai
токовые электроизмерительные, для чего предназначены измерительные, мультиметр
Токоизмерительные клещи продаются в специализированных магазинах по доступной ценеГлавной проблемой при измерении силы тока при помощи стандартного амперметра является то, что его нужно подключать с условием разрыва в электрической цепи. Исходя из данной ситуации, становится очевидным, что «горячий» способ снятия показаний невозможен без отключения нагрузок. В данном случае на помощь могут прийти токоизмерительные клещи, однако тем, кто впервые сталкивается с этим прибором, вряд ли знают, как им пользоваться. Стоит рассмотреть все тонкости более подробно.
Клещи электроизмерительные: обозначения и порядок измерений
В любую модификацию токоизмерительных клещей входят одни и те же составляющие части.
А именно:
- Переключатель диапазона и функций;
- Дисплей;
- Специальные разъемы для выхода;
- Кнопка фиксирования данных;
- Клещи с магнитопроводом.
Рассматривая любые клещи, например марки как clamp, дитце и meter: м266, ц4501, 266ft, dt266f, ц91, 266c, можно убедиться в их идентичности. Все указанные переключатели могут быть установлены в различные положения.
Токоизмерительные клещи включают в себя следующие режимы измерения:
- Напряжение постоянное;
- Переменное;
- Постоянный ток;
- Переменный;
- Проверку диодов;
- Прозвонку зуммером;
- Сопротивление.
Все три выхода клещей защищены от перегрузок и каждый из них рассчитан на определенный вид измерений.
Клещи электроизмерительные могут немного отличаться по внешнему виду, однако принцип работы у них одинаковый
В основном использование такого прибора не вызывает затруднений даже у новичка, однако не забывайте ознакомиться предварительно с техникой безопасности.
Электроизмерительные нагрузочные клещи предназначены для замера постоянного и переменного тока, они способны выдержать нагрузку любой силы до 1000в. Не редко можно встретить и самодельные токосъемные приборы. Принцип, по которому они работают, идентичен, собрать его не так сложно, если есть подробная схема и инструкция по применению каждой детали, однако для электрика, которому часто нужно проверить сеть лучше иметь покупной мультиметр или клампметр, чтобы от работы не отвлекал частый ремонт. Выбор остается за мастером, как выглядят самодельные клещи можно увидеть на фото
Правильное использование клещей заключается в следующем:
- Установите необходимый режим на переключателе;
- Нажмите кнопку для того чтобы раскрыть магнитопровод;
- Обхватите проводник в сети с постоянным или переменным током;
- Разместите клещи перпендикулярно относительно провода;
- Снимите показания с дисплея.
Наглядно, как проводится работа по измерению своими руками, и как пользоваться прибором правильно вы сможете увидеть на видео.
Токовые клещи: принцип работы
Если взять за пример простейшие токоизмерительные клещи, то можно понять, что в основу их работы положено действие одновиткового трансформатора.
Первичная обмотка представлена ничем иным как проводом или шиной, в которой проходит ток. Что касается вторичной обмотки, то она имеет большее количество витков расположенных на магнитопроводе и размещается в измерительных клещах. К вторичной обмотке подключается амперметр.
Следует отметить тот факт, что с помощью такого прибора как токоизмерительные клещи получать нужные данные по нагрузке не сложно, а сам процесс достаточно удобен.
Все действия заключаются в следующем:
- При помощи специальной рукоятки нужно выставить измеряемую величину;
- После этого клещи открываются, и в них вставляется проводник;
- Далее рукоятку опускают и клещи закрываются.
Перед тем как использовать токовые клещи, следует изучить инструкцию и ознакомиться с рекомендациями профессионалов
Все дальнейшие действия выполняются таким же образом как со стандартным тестером. Что касается подсоединения, то оно может проводиться как с изолированным проводом, так и с неизолированным. Самым главным условием является то, что клещи должны подключаться только к одной шине. Все показания по измерению тока в цепи вы сможете увидеть на индикаторе прибора.
Для того чтобы работа в труднодоступных местах была более комфортной, современные токовые приборы оснащены специальной кнопкой, нажатие которой позволяет фиксировать результат.
Благодаря такой кнопке после охвата проводника и размыкания магнитокопровода вы сможете зафиксировать и сохранить нужные показания прибора.
Электрические клещи современного типа чаще всего изготовляются по схеме, которая сочетает в себе трансформатор тока и прибор выпрямительного типа. Это позволяет подсоединять прибор к вторичной обмотке через шунты, а не прямым методом.
Какими преимуществами обладают электроизмерительные клещи
О том, какими преимуществами обладает такой прибор, знает каждый мастер, и если о них спросить, то перечислять можно очень долго.
Среди основных преимуществ такой конструкции можно выделить:
- Есть возможность избежать влияния прибора на конечный показатель измерения;
- Можно измерить ток любой величины, так как исключается магнитное насыщение;
- Упрощена калибровка, можно легко аппроксимировать весь диапазон, а зависимость остается линейной;
- Аппарат способен найти свое применение даже в цифровой технике и сможет провести оценку величин такого переходного процесса, где обычно не справляются обычные измерительные приборы.
- Способен контролировать ток прецизионных паяльных станций и сварочного аппарата;
- Может измерять ток плазмы в лабораторных условиях;
- Измеряет показатели дуги в печах плавления;
- Оценит пусковые токи рельсотрона;
- Способен смоделировать режим короткого замыкания;
- Может быть использован на железных дорогах для оценки сигналов;
- Идеальный вариант для рассмотрения закона Ампера в рамках школьной программы;
- Способен оценить ток, который был наведен с помощью магнитного поля на определенные части трансформатора.
И это далеко не полный список преимуществ данного аппарата, поэтому можно смело утверждать о том, что токоизмерительные клещи – это прибор, который необходим любому мастеру.
Измерительные клещи в современной электрической технике
Современные измерительные клещи и их модификации, как правило, совмещают в себе функцию обычного тестера. Этот вариант довольно выгодный для того чтобы получать показания высокого тока без прикасания к сетям. Однако следует учесть, что они могут обладать большой погрешностью. Сразу следует отметить тот факт, что для того чтобы расширить функционал стандартный прибор оснащается тремя входами.
Работать с измерительными клещами нужно сухими руками
А именно:
- Общим, который обозначат землю и минус – Common;
- Вход для того чтобы измерять напряжение и сопротивление – V;
- И вход для подключения внешних источников для того чтобы измерять сопротивление изоляций в электрических цепях – Ext.
Кроме этих дополнений есть модели, которые способны дат оценку температуре. Это делается при помощи специального щупа с сенсорным датчиком. Так же с помощью такого аппарата можно с легкостью прозвонить диод, но в данном случае, когда вы будете выбирать клещи, обратите внимание не соотношении качества и цены. Не забудьте осмотреть прибор на погрешности, большинство из них в случае замыкания показывают ненулевые отметки, что неудобно в работе. Ну а источник питания – это стандартная крона, как и во многих тестерах. В данном плане клещи для измерения тока не обладают недостатками.
Как пользоваться токоизмерительными клещами (видео)
Исходя из статьи описанной выше, можно понять, что токоизмерительные клещи, способны выполнять большой объем работы и существенно облегчить работу любому мастеру. При выборе аппарата старайтесь уделять внимание всем аспектам, которые смогут отвечать вашим требованиям. Кроме того, ознакомьтесь со всеми возможностями техники, которые мы описали выше и тогда сможете приобрести те клещи, которые смогут выполнить все предстоящие задания.
Добавить комментарий
6watt.ru
Что такое токовые клещи и зачем они нужны?
Токовые клещи обязательно должны быть в арсенале электрика и очень хорошо если они есть и у вас. В зависимости от модели они могут выполнять те же функции, что и обычные мультиметры. Это функции измерения постоянного и переменного напряжения, сопротивления цепи и т.д.
Токоизмерительные клещи почему то не пользуются популярностью у людей, а зря. Знать значение тока также необходимо, как и знать величину напряжения во время поиска какой-либо неисправности, например, при срабатывании автоматического выключателя. Может он срабатывает от перегрузки. Обычным мультиметром не электрик наврятли сможет померить потребляемую нагрузку.
Для чего нужны токовые клещи?
Из названия уже понятно, что токовые клещи нужны для измерения электрического тока. Их устройство позволяет произвести измерение тока без разрыва электрической цепи, т.е. на работающей электроустановке без ее остановки и производства дополнительных монтажных работ.
Как мы помним из школьной физики, что амперметр необходимо подключать в цепь последовательно, чтобы произвести измерения тока. Так работает обычный мультиметр, а вот токовые клещи работают по другому.
Они имеют магнитопровод в форме клещей, с помощью которого можно обхватить проводник и узнать величину протекающего по нему тока.
Какие бывают токовые клещи?
Они бывают со стрелочной индикацией. Это когда измеряемое значение тока фиксируются по отклонению стрелки на определенной шкале.
Еще бывают с цифровой индикацией. Это когда измеряемое значение тока выводится на дисплей, что реализовано на современных моделях.
Также эти устройства можно разделить по виду измеряемого тока. Обращайте на это внимание перед выбором модели.
Есть клещи, которые могут измерять и переменный и постоянный токи. Они немного дороже, но зато вы без проблем можете измерить утечку постоянного тока, которая разряжает аккумулятор в вашем автомобиле.
И есть модели, которые могут измерять только переменный ток. Они конечно подешевле, но зато вы тут ограничены измерениями только в сети переменного тока.
Из чего состоят токовые клещи?
Практически все такие устройства состоят из следующих элементов:
- Магнитопровод в форме клещей.
- Кнопка раскрытия клещей для обхвата проводника.
- Гнезда для подключения измерительных щупов.
- Ручка переключения режимов измерения.
- Электронный дисплей для вывода информации.
- Кнопка фиксации результатов измерения.
- Измерительные щупы, которые подключаются к соответствующим гнездам.
Как пользоваться токовыми клещами?
Здесь ничего сложного нет. Следуйте этому алгоритму:
- переводите ручку переключения режимов в нужное положение;
- нажимаете на кнопку раскрытия клещей;
- обхватываете одиночный проводник в сети переменного тока или в сети постоянного тока;
- расположите токовые клещи перпендикулярно плоскости проводника;
- отпускаете кнопку, таким образом, закрывая клещи и замыкая цепь магнитопровода устройства;
- снимаете с дисплея измеренные показания тока.
Запомните! Измерять ток можно только на отдельном одиночном проводнике. Только тогда вы получите правильное значение тока. Если вы клещами обхватите весь провод (фазный + нулевой проводники), то тогда вы получите сумму токов протекающих по этим обоим проводникам. Тут в идеале у вас должен высветиться нуль. Однако если прибор покажет какое-нибудь маленькое значение тока, то это будет означать, что в вашем оборудовании есть небольшая утечка тока, равная полученному значению.
Дополнительные функции токовых клещей
Практически все модели токоизмерительных клещей снабжены дополнительными функциями. Это как я уже писал выше возможностью измерения постоянного и переменного напряжения, сопротивления цепи, температуры и т.д. Поэтому они могут заменить обычные мультиметры. Прежде чем покупать мультиметр хорошо подумайте, может стоит приобрести токоизмерительные клещи.
Надеюсь, что теперь вы поняли что такое токовые клещи и за чем они нужны.
Не забываем улыбаться:
Разработчики:
Собрать все это очень легко! Даже ваши девушки ничего не перепутают — все разъёмы разные!
Начальник с гордостью:
Они у меня умненькие, они переходники найдут.
Клещи токоизмерительные: 8 вспомогательных режимов для работы
Клещи электроизмерительные: обозначения и порядок измерений
В любую модификацию токоизмерительных клещей входят одни и те же составляющие части.
А именно:
- Переключатель диапазона и функций;
- Дисплей;
- Специальные разъемы для выхода;
- Кнопка фиксирования данных;
- Клещи с магнитопроводом.
Рассматривая любые клещи, например марки как clamp, дитце и meter: м266, ц4501, 266ft, dt266f, ц91, 266c, можно убедиться в их идентичности. Все указанные переключатели могут быть установлены в различные положения.
Токоизмерительные клещи включают в себя следующие режимы измерения:
- Напряжение постоянное;
- Переменное;
- Постоянный ток;
- Переменный;
- Проверку диодов;
- Прозвонку зуммером;
- Сопротивление.
Все три выхода клещей защищены от перегрузок и каждый из них рассчитан на определенный вид измерений.
В основном использование такого прибора не вызывает затруднений даже у новичка, однако не забывайте ознакомиться предварительно с техникой безопасности.
Электроизмерительные нагрузочные клещи предназначены для замера постоянного и переменного тока, они способны выдержать нагрузку любой силы до 1000в. Не редко можно встретить и самодельные токосъемные приборы. Принцип, по которому они работают, идентичен, собрать его не так сложно, если есть подробная схема и инструкция по применению каждой детали, однако для электрика, которому часто нужно проверить сеть лучше иметь покупной мультиметр или клампметр, чтобы от работы не отвлекал частый ремонт. Выбор остается за мастером, как выглядят самодельные клещи можно увидеть на фото
Правильное использование клещей заключается в следующем:
- Установите необходимый режим на переключателе;
- Нажмите кнопку для того чтобы раскрыть магнитопровод;
- Обхватите проводник в сети с постоянным или переменным током;
- Разместите клещи перпендикулярно относительно провода;
- Снимите показания с дисплея.
Наглядно, как проводится работа по измерению своими руками, и как пользоваться прибором правильно вы сможете увидеть на видео.
Токовые клещи: принцип работы
Если взять за пример простейшие токоизмерительные клещи, то можно понять, что в основу их работы положено действие одновиткового трансформатора.
Первичная обмотка представлена ничем иным как проводом или шиной, в которой проходит ток. Что касается вторичной обмотки, то она имеет большее количество витков расположенных на магнитопроводе и размещается в измерительных клещах. К вторичной обмотке подключается амперметр.
Следует отметить тот факт, что с помощью такого прибора как токоизмерительные клещи получать нужные данные по нагрузке не сложно, а сам процесс достаточно удобен.
Все действия заключаются в следующем:
- При помощи специальной рукоятки нужно выставить измеряемую величину;
- После этого клещи открываются, и в них вставляется проводник;
- Далее рукоятку опускают и клещи закрываются.
Все дальнейшие действия выполняются таким же образом как со стандартным тестером. Что касается подсоединения, то оно может проводиться как с изолированным проводом, так и с неизолированным. Самым главным условием является то, что клещи должны подключаться только к одной шине. Все показания по измерению тока в цепи вы сможете увидеть на индикаторе прибора.
Для того чтобы работа в труднодоступных местах была более комфортной, современные токовые приборы оснащены специальной кнопкой, нажатие которой позволяет фиксировать результат.
Благодаря такой кнопке после охвата проводника и размыкания магнитокопровода вы сможете зафиксировать и сохранить нужные показания прибора.
Электрические клещи современного типа чаще всего изготовляются по схеме, которая сочетает в себе трансформатор тока и прибор выпрямительного типа. Это позволяет подсоединять прибор к вторичной обмотке через шунты, а не прямым методом.
Какими преимуществами обладают электроизмерительные клещи
О том, какими преимуществами обладает такой прибор, знает каждый мастер, и если о них спросить, то перечислять можно очень долго.
Среди основных преимуществ такой конструкции можно выделить:
- Есть возможность избежать влияния прибора на конечный показатель измерения;
- Можно измерить ток любой величины, так как исключается магнитное насыщение;
- Упрощена калибровка, можно легко аппроксимировать весь диапазон, а зависимость остается линейной;
- Аппарат способен найти свое применение даже в цифровой технике и сможет провести оценку величин такого переходного процесса, где обычно не справляются обычные измерительные приборы.
- Способен контролировать ток прецизионных паяльных станций и сварочного аппарата;
- Может измерять ток плазмы в лабораторных условиях;
- Измеряет показатели дуги в печах плавления;
- Оценит пусковые токи рельсотрона;
- Способен смоделировать режим короткого замыкания;
- Может быть использован на железных дорогах для оценки сигналов;
- Идеальный вариант для рассмотрения закона Ампера в рамках школьной программы;
- Способен оценить ток, который был наведен с помощью магнитного поля на определенные части трансформатора.
И это далеко не полный список преимуществ данного аппарата, поэтому можно смело утверждать о том, что токоизмерительные клещи – это прибор, который необходим любому мастеру.
Измерительные клещи в современной электрической технике
Современные измерительные клещи и их модификации, как правило, совмещают в себе функцию обычного тестера. Этот вариант довольно выгодный для того чтобы получать показания высокого тока без прикасания к сетям. Однако следует учесть, что они могут обладать большой погрешностью. Сразу следует отметить тот факт, что для того чтобы расширить функционал стандартный прибор оснащается тремя входами.
А именно:
- Общим, который обозначат землю и минус – Common;
- Вход для того чтобы измерять напряжение и сопротивление – V;
- И вход для подключения внешних источников для того чтобы измерять сопротивление изоляций в электрических цепях – Ext.
Кроме этих дополнений есть модели, которые способны дат оценку температуре. Это делается при помощи специального щупа с сенсорным датчиком. Так же с помощью такого аппарата можно с легкостью прозвонить диод, но в данном случае, когда вы будете выбирать клещи, обратите внимание не соотношении качества и цены. Не забудьте осмотреть прибор на погрешности, большинство из них в случае замыкания показывают ненулевые отметки, что неудобно в работе. Ну а источник питания – это стандартная крона, как и во многих тестерах. В данном плане клещи для измерения тока не обладают недостатками.
Как пользоваться токоизмерительными клещами (видео)
Исходя из статьи описанной выше, можно понять, что токоизмерительные клещи, способны выполнять большой объем работы и существенно облегчить работу любому мастеру. При выборе аппарата старайтесь уделять внимание всем аспектам, которые смогут отвечать вашим требованиям. Кроме того, ознакомьтесь со всеми возможностями техники, которые мы описали выше и тогда сможете приобрести те клещи, которые смогут выполнить все предстоящие задания.
Электроизмерительные приборы для контроля правильности расчета нагрузки неоновых трансформаторов
Расчет неоновой вывески — задача нетривиальная и требует достаточной квалификации проектировщика, который должен быть осведомлен о всевозможных нюансах, связанных с неоном. Тем не менее, точный расчет, даже при высокой квалификации проектировщика, не всегда возможен, так как каждая вывеска по сути неповторима, уникальна, то есть, как правило, состоит из неоновых ламп различной, неповторяющейся, конфигурации и длины. Именно поэтому, на финальном этапе, когда неоновые трубки подключаются к неоновому трансформатору, необходимы приборы, с помощью показаний которых можно внести коррективы в работу проектировщика. Приборов всего два, их наличие в любой неоновой мастерской является необходимым и достаточным. Это миллиамперметр и высоковольтный вольтметр. Наша компания предлагает Вашему вниманию мультиметр с токоизмерительными клещами и мультиметр с высоковольтным зондом.
Мультиметр с токоизмерительными клещами |
1. Мультиметр с токоизмерительными клещами — это очень полезный, если не сказать, незаменимый инструмент для контроля правильности расчета нагрузок для неоновых трансформаторов. |
Поскольку трубки изготавливаются вручную, то их электрические параметры могут немного отличаться у различных трубок, даже если они внешне абсолютно одинаковы. Именно поэтому нагрузочные таблицы носят лишь справочно-рекомендательный характер и не дают абсолютной гарантии точности при подборе нагрузки для неонового трансформатора.
Использование миллиамперметра позволяет наиболее точно подобрать требуемую нагрузку (длину трубок) к определенному номиналу трансформатора. Показания силы тока во вторичной цепи трансформатора являются определяющим критерием.
Если нагрузка подобрана верно, то трансформатор будет работать долго и без отказов, исключая, конечно, форс-мажорные обстоятельства (например, механические повреждения неоновых трубок или трансформаторов, произошедшие в результате действий людей, животных или стихийных бедствий).
Миллиамперметр незаменим при выезде на объекты для определения причин неработоспособности неоновой рекламной установки в целом, и неоновых трансформаторов в частности. Токоизмерительные клещи позволяют производить замер на работающей неоновой установке, тем самым значительно сокращая количество лишних операций (включение/выключение питания, включение во вторичную цепь миллиамперметра и т.п.), экономя драгоценное время и обеспечивая оператору больший комфорт и дополнительную электробезопасность.
Функции мультиметра с токоизмерительными клещами не ограничиваются измерением силы тока в миллиамперах. Диапазон измерения силы тока распространяется до 60 А. Кроме этого можно измерить напряжение до 600 Вольт, сопротивление до 400 ом и непрерывность цепи (звуковой сигнал).
Имеется также переключатель фильтра частот (50 Гц / 1 кГц), который позволяет определить наличие паразитных гармоник в питающей сети. Погрешность измерений 1 — 2 % для диапазона.
Мультиметр с высоковольтным зондом |
2. Мультиметр с высоковольтным зондом — это также очень полезный инструмент. Он позволяет измерить напряжение на высоковольтных клеммах неонового трансформатора (до 15 кВ). |
Для чего это нужно?
Во первых, это может быть нужно для определения работоспособности неонового трансформатора. Измерив ток короткого замыкания на вторичной обмотке с помощью токоизмерительных клещей и напряжение холостого хода на каждом плече неонового трансформатора, мы получаем данные, которые будут говорить либо о работоспособности трансформатора, либо о его выходе из строя.
Во-вторых, это бывает нужно для определения качества неоновых трубок. Например, искровой тестер показывает, что все трубки в цепи рабочие (газ в трубке светится), но трансформатор не тянет подключенную нагрузку, несмотря на нормальное напряжение в сети. Первое (и часто единственное), что обычно в таких случаях приходит в голову электрика-монтажника — неисправен трансформатор. Но это не всегда так.
Измерив напряжение на высоковольтных клеммах трансформатора с подключенной нагрузкой и силу тока во вторичной цепи этого трансформатора, можно понять реальные причины такого положения вещей.
Если трансформатор в норме и напряжение в сети тоже в норме, тогда, соответственно, должен возникнуть вопрос о качестве неоновых трубок: насколько качественно были изготовлены неоновые трубки (если вывеска новая) или насколько сильно они состарились (если вывеска древняя).
После проведения этих несложных исследований будет гораздо легче разобраться в ситуации, принять взвешенное и аргументированное решение и действительно грамотно исправить возникшую ситуацию: либо заменить старые трубки (иногда это нужно делать вместе с высоковольтной проводкой), либо заменить трансформатор.
Цифровой мультиметр GDM-396 |
||
Особенности:
|
|
|
Постоянное напряжение
Диапазон: 400 мВ-600 В (5 поддиапазонов) |
|
Переменное напряжение
Диапазон: 4-750 В (40-400 Гц) |
Постоянный ток
Диапазон: 400 мкА-10 А |
|
Переменный ток
Диапазон: 400 мкА-10 мА (50-400 Гц) |
Измерение сопротивления
Диапазон: 400 Ом-40 МОм |
|
Прозвонка Диапазон включения сигнала: 70 Ом |
Испытание диодов Тестовое напряжение: 1,5 В |
|
Испытание конденсаторов
Диапазон: 40 nF:100 чF |
Измерение частоты
Диапазон: 10 Гц-10 МГц |
|
Измерение температуры
Диапазон измерений: -40/1000 С |
Дополнительные функции
|
|
Общие данные
|
Современный метод измерения напряжённости электрического или магнитного поля.ВведениеКлещеобразные токовые датчики разработаны для расширения возможностей измерения цифровых мультиметров, измерителей параметров мощности, осциллографов, портативных осциллографов, регистрираторов или самописцев, и других разнотипных инструментов. При тестировании клещи смыкаются вокруг проводника тока для проведения бесконтактного измерения без разрыва цепи. Выходные значения в виде напряжения или тока прямо пропорциональны измеряемому току. Это дает возможность проводить измерения и выводить значения на дисплей приборов с небольшим диапазоном входных значений напряжения и тока. При измерениях проводник тока не разрывается и остаётся электрически изолированным от входов измерительного прибора. В результате чего низковольтные входы могут быть переведены в третье состояние (с высоким импедансом) или заземлены. Для выполнения измерения с помощью токового датчика нет необходимости прерывать подачу питания, что устраняет простои, обходящиеся подчас очень дорого. Измерение действительных среднеквадратических значений, в диапазоне частотных характеристик датчика, возможно при использовании токового датчика CHAUVIN ARNOUX с мультиметром RMS, предназначенным для измерения среднеквадратических значений. В большинстве случаев измерение среднеквадратических значений ограничивается не возможностями данных токовых датчиков, а приборами к которым они подключены. Наилучшие результаты измерения обеспечиваются при применении датчиков обладающих высокой точностью, хорошей частотной характеристикой, при минимальном сдвиге фаз. CHAUVIN ARNOUX предлагает широкий выбор токовых датчиков для измерения постоянного (DC) и переменного (AC) тока. Несколько токовых датчиков CHAUVIN ARNOUX имеют патенты на их уникальную схему и дизайн. Токовые датчики для измерения переменного тока.Принцип работыТоковый датчик для измерения параметров переменного тока может рассматриваться как разновидность простого трансформатора тока. Трансформатор (рис.1) по существу имеет две катушки на общем железном сердечнике. Напряжение I1подаётся на катушку В1, наводя через общий сердечник напряжение I2 на катушке В2. Число витков на каждой катушке и значение напряжения имеют отношение по формуле: N1 x I1 = N2 x I2, где N1 и N2 это число витков на каждой катушке. Из этого отношения следует: I2 = N1 x I1/N2 и I1 = N2 x I2/N1. Рисунок1Тот же самый принцип используется в токовом датчике (рис. 2). На замкнутом магнитопроводе в виде клещей замкнутых на проводнике, находится катушка B2 , по которой протекает электрический ток I1. В1 это просто проводник, на котором пользователь проводит измерения, при количестве обмоток, образуемых проводником — равным единице. Токовый датчик замкнутый вокруг проводника вырабатывает выходной ток, значения которого определяются количеством витков на катушке В2, по формуле: I2 (выход датчика) = (N1 / N2) x I1, где N1 = 1 или, иначе, Выходное зачение датчика = I1/N2 (где N2 это число витков на катушке датчика). Часто бывает очень трудно измерить I1 непосредственно, так как значение силы тока слишком велико, чтобы подавать его непосредственно на цепь измерительного прибора, или просто потому, что недопустимо разрывать цепь. Для обеспечения приемлемого выходного значения на катушке датчика размещается большое количество витков. Рисунок 2Количество витков на катушке датчика в большинстве случаев имеют кратные значения (например, 100, 500 или 1000). Если N2 равно 1000, в этом случае клещи имеют соотношение N1/ N2 или 1/1000, которое обозначается как 1000:1. Ещё один способ выразить соотношение это сказать что выходное значение датчика 1 мА/А — выходное значение 1 мА (I2) для 1А (или 1А@1000А) появляющееся на дисплее датчика. Существует множество других возможных соотношений: 500:5, 2000:2, 3000:1, 3000:5 и так далее — для различного применения. В большинстве случаев токовый датчик используется с цифровым мультиметром. Рассмотрим для примера токовый датчик с соотношением 1000:1 (модель C30) с токовым выходом и соотношением 1мА/A. Данное соотношение означает, что ток, протекающий через захваты токовых клещей преобразуется в ток на выходе следующим образом:
Выход датчика подключается к цифровому мультиметру, в режиме измерения переменного тока в соответствующем диапазоне значений для преобразования выходного сигнала датчика. Затем, для определения параметров тока в проводнике необходимо умножить показания мультиметра на соотношение датчика (например, значение 150 мА в диапазоне измерения 200 мА соответствует силе тока 150 мА x 1000 = 150 A в измеряемом проводнике). Токовые клещи могут использоваться и с другими приборами измеряющими ток в диапазоне, соответствующем выходу датчика, если данные измерительные приборы имеют требуемое входное сопротивление (см. рис. 3). Рисунок 3Токовые датчики могут также иметь выходы как по току так и по напряжению, для осуществления измерений тока приборами имеющими только входы по напряжению (регистрирующие устройства, осциллографы и т.д. рис. 4 и 5). Рисунок 4Рисунок 5Это просто осуществить согласованием токового выхода датчика с датчиком, имеющем на выходе напряжение (модель Y4N или Mini1). В этих случаях напряжение на выходе датчика в мВ пропорционально измеряемому току (напр. 1мВ/А переменного тока). Токовые клещи для измерения параметров постоянного и переменного токаПринцип работы (эффект Холла)В отличие от традиционных преобразователей переменного тока, измерение параметров переменного и постоянного тока часто осуществляется посредством измерения напряжённости магнитного поля созданного проводником тока в полупроводниковом кристалле в соответствиис эффектом Холла. Когда тонкий полупроводник (рис. 6) располагается под прямым углом к магнитному полю (B), и на него подаётся ток (Id), на концах полупроводника возникает напряжение (Vh). Это напряжение известно как напряжение Холла, в честь американского учёного Эдвина Холла, который первым открыл это явление. Рисунок 6Когда ток возбуждения (Id) в устройстве Холла поддерживается постоянным, напряжённость магнитного поля (B) является прямо пропорциональной току в измеряемом проводнике. Таким образом, выходное напряжение (Vh) соответствует данному току. Подобная схема имеет два важных преимущества для измерения параметров тока:
Базовая конструкция датчика в виде токовых клещей в показана на рис. 7 (примечание: используется один или два генератора Холла в зависимости от типа токового датчика). Рисунок 7Большинство токовых датчиков CHAUVIN ARNOUX, для измерения переменного и постоянного тока, разработаны на принципе рассмотренн ом выше, с использованием запатентованной электронной схем объединяющей в себе преобразование сигнала для передачи на линейный выход и цепь компенсации температуры. Токовые датчики имеют широкий динамический диапазон и частотную характеристику, а также выходной линейный сигнал высокой точности. Они могут применяться во всех областях измерения тока до 1500 A. Постоянный ток может быть измерен без дорогих, мощных шунтов. Переменный ток частотой до нескольких килогерц может быть измерен с точностью требуемой для измерения сложных сигналов, а также для измерения среднеквадратических значений. Выходной сигнал токового датчика в милливольтах мВ (мВ DC при измерении постоянного тока, и мВ AC при измерении переменного тока), выход датчика может быть подключен к большинству приборов, имеющих вход для измерения напряжения, как мультиметр, осциллограф, портативный осциллограф, самописец и т.п. CHAUVIN ARNOUX также предлагает различные решения для измерение постоянного тока, такие как К1 и К2, разработанные для измерения постоянного тока с очень небольшим значением, использующие технологии с насыщенным магнитным полем. Датчики для переменного и постоянного тока позволяют измерять и выводить на дисплей действительные среднеквадратические для значения для AC или AC+ DC. Измерение переменного и постоянного тока: Подключите датчик к измерительному прибору. Выберите функцию и диапазон измерения. Замкните датчик вокруг одного провода. Считайте значение тока в проводнике. Пример:Рисунок 8Измерение переменного тока (АС): модель датчика тока: Y2N Соотношение:1000:1 Измерение постоянного тока (DC): модель датчика тока: PAC 21 1 мВ DC/A DC (датчик Холла) Измерение переменного тока AC: модель датчика: PAC 11 Выход -1 мВ AC/A AC Измерение постоянного тока DC: микродатчик К1. Выход:1 мВ/мА Измерение малых значений тока, измерение на петлях из проводника, измерение тока утечки и другие измеренияДля измерения малого тока предлагается большое число датчиков, например К1 и К2 имеют чувствительность 50 мА DC, а модель K2 может быть использована для измерения на кольцах из проводника с ток ом 4-20 мА. Имеется специальный раздел каталога для датчиков, измеряющих малые значения тока. Пример: Если измеряемое значение слишком мало, для использования датчика или для увеличения точности измерения можно замкнуть клещами несколько петель проводника тока. Значение тока определяется отношением показания прибора к количеству витков проводника охваченных токовыми клещами (показания прибора необходимо разделить на количество витков замкнутых клещами). Пример: Рисунок 9Когда токовые клещи замкнуты вокруг двух проводников с различной полярностью, прибор будет показывать разницу значений тока двух проводников. Если значения равны прибор будет показывать нулевое значение (рис. 10). Если прибор показывает значение отличное от «0», то прибор показывает значение утечки тока для данной нагрузки. Рисунок 10Для измерения малых значений тока или для измерения утечки необходимо использовать токоизмерительные клещи предназначенные для измерения небольших значений, как, например модель В2. Ток утечки на землю может быть измерен непосредственно при использовании следующей простой модели (рис. 11). Рисунок 11Пример : рис. 11. Модель датчика Miniclamp
1 Выбор датчика тока. Ответ на следующие вопросы поможет Вам выбрать токовый датчик для соответствующего применения. 1. Определите тип измеряемого тока: переменный или постоянный ток (датчики, предназначенные для измерения постоянного тока, имеют обозначение AC/DC (переменный/постоянный), так как они могут измерять значения, как для переменного, так и для постоянного тока). 2. Определите наибольшее и наименьшее значение. Определите подходит ли точность измерения в нижнем диапазоне или выберите токовый датчик для малых значений тока. Многие датчики имеют высокую точность измерения в верхнм диапазоне. Некоторые же предназначены для измерения небольших значений переменного или постоянного тока. 3. Какой диаметр провода необходимо охватить клещами? Этот параметр определяет необходимый размер токовых клещей. 4. Какой тип выхода датчика необходим Вам или в каких единицах будет выполняться измерение (мА, мВ, AC, DC, и т.п.)? Убедитесь, что входной импеданс измерительного прибора соответствует техническим требованиям. Другие факторы, которые Вам необходимо учесть.
Обратите внимание на характеристики по частотным параметрам и по сдвигу фаз. |
Подъемные зажимы
Подъемные зажимы Зажимы с вертикальной стопорной пластиной Функция блокировки для дополнительной безопасности. Зажимы на вертикальную нагрузку; Во время подъема груз остается вертикальным. Вместимость: до 66000 фунтов Просмотреть больше » Вертикальные пластинчатые зажимы во всех положениях Зажимы на горизонтальную или вертикальную нагрузку; Во время подъема груз остается вертикальным. Вместимость: до 66000 фунтов Просмотреть больше » Зажимы для пластин из нержавеющей стали, все позиции Устойчивость к коррозии.Зажимы на горизонтальную или вертикальную нагрузку; Во время подъема груз остается вертикальным. Вместимость: до 4400 фунтов. Просмотреть продукты » Регулируемые пластинчатые зажимы во всех положениях Регулируемые губки для зажима грузов под разными углами; Во время подъема груз остается вертикальным. Емкость: до 6600 фунтов Просмотреть продукты » Зажимы для вертикальных пластин с цепью Зажим с цепью и сцепным звеном. Зажимы на вертикальную нагрузку; Во время подъема груз остается вертикальным. Грузоподъемность: до 6000 фунтов Просмотреть продукты » Зажимы для немаркированных материалов Для обработки нержавеющей стали, алюминия, меди, дерева и мрамора.Горизонтальные и вертикальные версии. Емкость: до 6600 фунтов Просмотреть больше » Зажимы для профильных пластин Holland Зажимы на пластине с П-образным выступом. Зажимы на вертикальную нагрузку; Во время подъема груз остается вертикальным. До 3300 фунтов. Просмотреть больше » Зажимы для подъемной балки Для зажима и подъема двутавров. До 6600 фунтов. Просмотреть больше » Зажимы для горизонтальных пластин Хомуты на горизонтальную нагрузку; Во время подъема груз остается горизонтальным.Емкость: до 16500 фунтов Просмотреть больше » Горизонтальные зажимы для тонких листов Для использования на тонких листах. Хомуты на горизонтальную нагрузку; Во время подъема груз остается горизонтальным. Емкость: до 6600 фунтов Просмотреть больше » Горизонтальные зажимы для штабелей и пакетов Для использования в связках и стопках. Хомуты на горизонтальную нагрузку; Во время подъема груз остается горизонтальным. Емкость: до 9900 фунтов Просмотреть больше »Типы зажимов и когда их использовать
Кто бы мог подумать, что соединение двух частей материала может быть настолько сложным? Из-за бесчисленных разновидностей зажимов может быть сложно отследить, какой из них использовать для вашей работы.Есть зажимы для металлообработки, деревообработки, подъема и особых случаев.
Правила зажима:
- Всегда используйте кусок древесины между зажимными губками и деревянными деталями, чтобы не повредить деталь.
- Приложите зажимную нагрузку перпендикулярно детали, чтобы предотвратить соскальзывание.
- Всегда используйте как минимум два зажима для предотвращения вращения.
- Не перетягивайте зажим.Чрезмерное затягивание может повредить хомут
Димидный зажим:
Зажим Dimide Clamp — это сверхмощный зажим для металлообработки и сварки, который специализируется на сочетании скорости и мощности благодаря совместимости с ударными гайковертами. Зажим Dimide Clamp, разработанный для высоких крутящих нагрузок, прикладываемых ударным ключом, представляет собой надежный зажим, который идеально подходит для сжатия деталей, предотвращения их проскальзывания, устранения узких мест зажима на производственной линии и многого другого.Зажим Dimide также имеет съемную Т-образную рукоятку и шестигранную головку. Это позволяет легко регулировать зажим при установке в более узкие зазоры и использовать широкий спектр отверток, включая трещотки, гайковерты, динамометрические ключи, бруски выключателя и многое другое. Зажим также поставляется с медными винтами и ножками и оцинкованными пластинами. Это сохраняет зажим, предотвращая скопление сварочных брызг и ржавление.
Идеально для:
- Высокая нагрузка
- Быстрое действие
- Сварка
- Металлообработка
- Обработка
Зажимы Dimide Long Series:
Хомуты Dimide Long Series — идеальный хомут, когда вам нужна большая досягаемость.Предлагая сменные рукоятки с радиусом действия до 60 дюймов, вы можете удовлетворить требования любого проекта. Башмак с Т-образной рукояткой обеспечивает механическое преимущество, позволяя получить большую силу даже при большом вылете. Обеспечивает отличную жесткость на скручивание за счет жесткого корпуса и прямоугольных трубных рычагов. Отказоустойчивый срезной болт предотвращает поломку хомута из-за чрезмерной затяжки.
Идеально для:
- Производство листового металла
- Деревообработка
- Autobody Work
- Любое другое приложение, требующее большой дальности действия.
C-Clamp (также известный как G-Clamps):
Популярный C-Clamp — стандартный зажим для многих случаев. Его простота и доступность не имеют себе равных. Каждая коллекция зажимов начинается с нескольких размеров C-Clamp. Из-за популярности C-Clamp доступны различные конструкции для разных случаев.
Эти конструкции включают:
- Стандартные C-образные зажимы: наиболее распространенные зажимы
- C-образные зажимы с двойной опорой: равномерное распределение нагрузки
- Быстроразъемные C-образные зажимы: быстрое действие
- C-образные зажимы с медным покрытием: предотвращают образование брызг при сварке
- С-образные зажимы с глубоким вылетом: для большого вылета
- Стопорные C-образные зажимы: использование одной рукой
Идеально для:
- Деревообработка
- Металлообработка
- Низкая стоимость
F-зажимы (также известные как стержневые зажимы)
Зажим f разработан для широкого открывания.F-образный зажим имеет ползунок, который позволяет легко регулировать открывающую способность в соответствии с широким спектром применений. Это сделало F-образный зажим еще одним очень популярным зажимом, который используется, когда открывающая способность C-образного зажима слишком мала.
Идеально для:
- Деревообработка
- Сварка
- Металлообработка
- Большая открывающая способность
Зажимы для труб
Зажим для трубы аналогичен F-образному зажиму, за исключением того, что вместо скользящей штанги он используется для скользящей трубы.Это позволяет трубному зажиму соответствовать любой необходимой вам пропускной способности, если у вас есть труба подходящего размера.
Идеально для:
- Деревообработка
- Сварка
- Металлообработка
- Большая открывающая способность
Параллельные зажимы
Параллельные зажимы, также как и f-образный зажим, обеспечивают большую раскрывающую способность.Идеально подходят для обработки дерева, зажимные губки остаются параллельными при повышенных нагрузках, что обеспечивает большую площадь распределения и предотвращает образование ямок на древесине.
Идеально для:
- Деревообработка
- Большая открывающая способность
Зажимы быстрого действия
Зажимы Quickgrip или быстродействующие зажимы очень популярны сегодня. Их можно затянуть одной рукой, качнув ручку толкателя.Они также похожи на f-зажимы в том, что их раскрывающая способность зажима может варьироваться.
Идеально для:
- Скорость
- Одноручный
- Деревообработка
Стопорные зажимы
Запорные зажимы — еще один очень популярный зажим . Они быстрые и могут использоваться одной рукой , что делает их идеальными для сварки.
Идеально для:
- Скорость
- Одноручное
- Сварка
- Металлообработка
- Деревообработка
Зажимы для листового металла
Зажимы для листового металла похожи на фиксирующие зажимы, за исключением того, что они имеют большую площадь поверхности зажимных губок, что делает их идеальными для зажима листового металла и подобных материалов.
Идеально для:
- Листовой металл
- Металлообработка
- Скорость
- Одноручное
Зажимы для цепей
Блокирующий зажим цепи аналогичен блокирующему зажиму, но позволяет приложить зажимную нагрузку в ограниченном пространстве, поскольку вы можете зажать цепь внутри и вокруг трубы или чего-либо еще, что находится рядом с другой поверхностью.Цепь также позволяет ей зажимать различные формы, потому что она будет обертываться вокруг объекта и оказывать давление при натяжении цепи.
Идеально для:
- Металлообработка
- Скорость
- Одноручное
- Различные формы
Хомуты Kant-Twist
Любимый многими механическими цехами и сварщиками зажим Kant-twist передает нагрузку с помощью двух параллельных губок, предотвращая их перемещение.Ручка, расположенная перпендикулярно к нагрузке зажима, также предотвращает скручивание зажима (скручивание Канта) во время затяжки.
Идеально для:
- Сварка
- Металлообработка
- Обработка
- Деревообработка
Зажимы для шурупов по дереву:
Ручной винтовой зажим для дерева — это традиционный зажим для деревообработки. Челюсти поворачиваются, что позволяет зажимать под разными углами.
Идеально для:
Пружинные зажимы
Пружинные зажимы быстрые и очень доступные. Однако они обеспечивают небольшую зажимную нагрузку и имеют очень ограниченную способность открывания. Это делает их идеальными для удержания брезента или предотвращения движения по одной оси, которая не получает никакой нагрузки.
Идеально для:
- Доступный
- Деревообработка
- Скорость
Зажимы створки
Подобно параллельным зажимам, зажимы для створок используются для склеивания широких панелей и больших сборок.
Идеально для:
- Деревообработка
- Большие сборки
Зажимы для скамейки (также известные как рычажные зажимы)
Настольные зажимы привинчиваются к рабочим столам. Это позволяет быстро закрепить сборку. Они идеально подходят для использования с деревянным столом, а также могут использоваться с другими столами с помощью дополнительных принадлежностей.
Идеально для:
- Сборки
- Деревообработка
- Сварка
Зажимы под углом (также известные как угловой зажим)
Зажим для резки под углом идеально подходит для соединения углов при сборке.
Идеально для:
Зажимы для фоторамки
Зажим для фоторамок идеально подходит для зажима прямоугольных сборок, таких как рамы для картин, опоры для столов, оконные рамы и т. Д.
Идеально для:
Зажимы кромочные
С помощью трех отдельных винтов кромочный зажим может контролировать свое положение по двум осям. Это делает зажим идеальным для зажима деталей для стыкового шва или для склеивания сборки.
Идеально для:
- Сварка
- Деревообработка
Зажимы для шкафов
Зажим для шкафов выравнивает два соседних шкафа так, чтобы лицевые рамы были заподлицо, что позволяет вам скрепить их винтами. Они достигают этого за счет приложения зажимной нагрузки по двум осям.
Идеально для:
Зажимы для стола
Зажим стола должен использоваться с прилагаемым сварочным столом.Они используются для сварочных узлов и позволяют быстро зажать одной рукой.
Идеально для:
Веб-зажимы (также известные как ленточные или ленточные зажимы)
Зажимы для полотна лучше всего подходят для обработки сложных форм. Углы используются для фиксации ленты для приложения нагрузки к сборке. Эти зажимы используются в основном для обработки мебели по дереву.
Идеально для:
- Деревообработка
- Транспортные трюмы
Зажимы балки
Зажимы для балок используются для подъема стальных балок и листов.
Идеально для:
Ножничные зажимы (также известные как щипцы для плит)
Ножничный зажим — еще один подъемный зажим. Благодаря ножничному действию этот зажим использует вес поднимаемого предмета для приложения зажимной нагрузки. Зажим также обеспечивает грубые зажимные губки, чтобы лучше проникать в поднимаемую деталь и улучшать захват.
Идеально для:
Зажим для подъема вертикальной плиты
В этом зажиме используются вращающиеся зубцы, которые используют вес поднимаемого объекта для приложения повышенной нагрузки, предотвращающей скольжение пластины.
Идеально для:
Пневматические силовые зажимы
Пневматические силовые зажимы используют сжатый воздух для приложения зажимной нагрузки. Эти зажимы используются для производственных циклов и машин.
Идеально для:
- Большая производственная мощность
- Скорость
Гидравлические зажимы
Аналогичен пневматическим зажимам, за исключением того, что в них используется гидравлическая энергия или жидкость под давлением для приложения зажимной нагрузки.
Идеально для:
Хомуты
Хомуты для шлангов используются для закрепления шланга на фитинге. Они популярны для поливных или автомобильных шлангов.
Идеально для:
Кабельные зажимы
Кабельные зажимы используются для удержания кабеля вдоль пути.
Идеально для:
- Направляющие и опоры для кабелей
Зажимы заземления
Заземляющие зажимы обладают высокой проводимостью и используются для заземления электрического тока.
Идеально для:
Знаете какие зажимы или инструкции по зажиму мы упустили? Прокомментируйте, пожалуйста, ниже, и мы обязательно обновим этот список!
Поделитесь этим списком со всеми, кого вы знаете!
АТФаз с зажимом-загрузчиком и эволюция механизмов репликации ДНК | BMC Biology
Benkovic SJ, Valentine AM, Salinas F: Реплисома-опосредованная репликация ДНК. Анну Рев Биохим. 2001, 70: 181-208. 10.1146 / annurev.biochem.70.1.181.
PubMed CAS Google Scholar
Померанц Р. Т., О’Доннелл М: Механика реплисом: взгляд на машину с двойной ДНК-полимеразой. Trends Microbiol. 2007, 15: 156-164. 10.1016 / j.tim.2007.02.007.
PubMed CAS Google Scholar
Вивона Дж. Б., Кельман З .: Разнообразный спектр белков, взаимодействующих со скользящим зажимом. FEBS Lett. 2003, 546: 167-172. 10.1016 / S0014-5793 (03) 00622-7.
PubMed CAS Google Scholar
Bloom LB: Зажимы для репликации и репарации ДНК. Ремонт ДНК (Amst). 2009, 8: 570-578. 10.1016 / j.dnarep.2008.12.014.
CAS Google Scholar
DePamphilis M: Репликация ДНК и болезни человека. 2006, Вудбери, Нью-Йорк: Лаборатория издательства Колд-Спринг-Харбор, 1
Google Scholar
Лоуренс Т., Квон И., Джонсон А., Холларс К., О’Доннелл М., Камареро Дж., Барски Д.: Движение скользящего зажима ДНК, наблюдаемое с помощью флуоресцентной спектроскопии одиночных молекул.J Biol Chem. 2008, 283: 22895-22906. 10.1074 / jbc.M800174200.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Stukenberg PT, Studwell-Vaughan PS, O’Donnell M: Механизм скользящего бета-зажима холофермента ДНК-полимеразы III. J Biol Chem. 1991, 266: 11328-11334.
PubMed CAS Google Scholar
Георгеску Р.Э., Ким С.С., Юрьева О., Курьян Дж., Конг Х-П, О’Доннелл М.: Структура скользящего зажима на ДНК.Клетка. 2008, 132: 43-54. 10.1016 / j.cell.2007.11.045.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
McNally R, Bowman GD, Goedken ER, O’Donnell M, Kuriyan J: Анализ роли контактов PCNA-ДНК во время нагрузки зажима. BMC Struct Biol. 2010, 10: 3-10.1186 / 1472-6807-10-3.
PubMed PubMed Central Google Scholar
Kong XP, Onrust R, O’Donnell M, Kuriyan J: Трехмерная структура бета-субъединицы E.coli ДНК-полимераза III голофермент: скользящий зажим ДНК. Клетка. 1992, 69: 425-437. 10.1016 / 0092-8674 (92) -И.
PubMed CAS Google Scholar
Джарвис Т.С., Пол Л.С., фон Хиппель PH: Структурные и ферментативные исследования системы репликации ДНК Т4. I. Физическая характеристика полимеразного вспомогательного белкового комплекса. J Biol Chem. 1989, 264: 12709-12716.
PubMed CAS Google Scholar
Shamoo Y, Steitz TA: Создание реплисомы из взаимодействующих частей: скользящий зажим в комплексе с пептидом из ДНК-полимеразы и комплексом редактирования полимеразы. Клетка. 1999, 99: 155-166. 10.1016 / S0092-8674 (00) 81647-5.
PubMed CAS Google Scholar
Моарефи И., Джерузалми Д., Тернер Дж., О’Доннелл М., Куриян Дж .: Кристаллическая структура фактора процессивности ДНК-полимеразы бактериофага Т4. J Mol Biol. 2000, 296: 1215-1223.10.1006 / jmbi.1999.3511.
PubMed CAS Google Scholar
Кришна Т.С., Конг Х.Р., Гэри С., Бургерс П.М., Куриян Дж .: Кристаллическая структура фактора процессивности эукариотической ДНК-полимеразы PCNA. Клетка. 1994, 79: 1233-1243. 10.1016 / 0092-8674 (94) -0.
PubMed CAS Google Scholar
Matsumiya S, Ishino Y, Morikawa K: Кристаллическая структура скользящего зажима ДНК архей: ядерный антиген пролиферирующих клеток из Pyrococcus furiosus.Protein Sci. 2001, 10: 17-23. 10.1110 / ps 36401.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Маки Х., Корнберг А. Полимеразная субъединица ДНК-полимеразы III Escherichia coli. II. Очистка альфа-субъединицы, лишенной нуклеазной активности. J Biol Chem. 1985, 260: 12987-12992.
PubMed CAS Google Scholar
О’Доннелл М.Э., Корнберг А: Динамика холофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli при репликации мультипраймированной матрицы.J Biol Chem. 1985, 260: 12875-12883.
PubMed Google Scholar
Mok M, Marians KJ: Препримосома Escherichia coli и геликаза ДНК B могут образовывать репликационные вилки, которые перемещаются с одинаковой скоростью. J Biol Chem. 1987, 262: 16644-16654.
PubMed CAS Google Scholar
МакИнерни П., Джонсон А., Кац Ф., О’Доннелл М.: Характеристика реплисомы тройной ДНК-полимеразы.Mol Cell. 2007, 27: 527-538. 10.1016 / j.molcel.2007.06.019.
PubMed CAS Google Scholar
Фэй П.Дж., Йохансон К.О., МакГенри С.С., Бамбара Р.А.: классы размеров продуктов, синтезируемых процессивно ДНК-полимеразой III и ДНК-полимеразой III голофермента Escherichia coli. J Biol Chem. 1981, 256: 976-983.
PubMed CAS Google Scholar
Yao N, Georgescu R, Finkelstein J, O’Donnell M: Одномолекулярный анализ показывает, что отстающая цепь увеличивает процессивность реплисомы, но замедляет прогрессию репликационной вилки.Proc Natl Acad Sci USA. 2009, 106: 13236-13241. 10.1073 / pnas.07106.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Онруст Р., Финкельштейн Дж., Нактинис В., Тернер Дж., Фанг Л., О’Доннелл М.: Сборка машины для репликации хромосом: две ДНК-полимеразы, зажим-загрузчик и скользящие зажимы в одной холоферментной частице. I. Организация захвата погрузчика. J Biol Chem. 1995, 270: 13348-13357. 10.1074 / jbc.270.22.13348.
PubMed CAS Google Scholar
О’Доннелл М., Джерузалми Д., Куриян Дж .: Структура загрузчика с зажимом предсказывает архитектуру холофермента ДНК-полимеразы III и RFC. Curr Biol. 2001, 11: R935-946. 10.1016 / S0960-9822 (01) 00559-0.
PubMed Google Scholar
Стадвелл-Воган PS, О’Доннелл М: Конституция двойной полимеразы холофермента ДНК-полимеразы III.J Biol Chem. 1991, 266: 19833-19841.
PubMed CAS Google Scholar
Kim S, Dallmann HG, McHenry CS, Marians KJ: Сцепление репликативной полимеразы и геликазы: взаимодействие тау-DnaB опосредует быстрое движение вилки репликации. Клетка. 1996, 84: 643-650. 10.1016 / S0092-8674 (00) 81039-9.
PubMed CAS Google Scholar
Синха Н.К., Моррис К.Ф., Альбертс Б.М.: Эффективная репликация in vitro матриц двухцепочечной ДНК с помощью системы репликации очищенного бактериофага Т4.J Biol Chem. 1980, 255: 4290-4293.
PubMed CAS Google Scholar
Zhang Z, Shibahara K, Stillman B: PCNA связывает репликацию ДНК с эпигенетическим наследованием у дрожжей. Природа. 2000, 408: 221-225. 10.1038 / 35041601.
PubMed CAS Google Scholar
Miller A, Chen J, Takasuka TE, Jacobi JL, Kaufman PD, Irudayaraj JMK, Kirchmaier AL: Ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA) необходим для регулируемого клеточного цикла молчащего хроматина на реплицированных и нереплицированных генах.J Biol Chem. 2010, 285: 35142-35154. 10.1074 / jbc.M110.166918.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Neuwald AF, Aravind L, Spouge JL, Koonin EV: AAA +: класс шапероноподобных АТФаз, связанных со сборкой, работой и разборкой белковых комплексов. Genome Res. 1999, 9: 27-43.
PubMed CAS Google Scholar
Abrahams JP, Leslie AG, Lutter R, Walker JE: Структура при разрешении 2,8 F1-АТФазы из митохондрий бычьего сердца. Природа. 1994, 370: 621-628. 10.1038 / 370621a0.
PubMed CAS Google Scholar
Erzberger JP, Berger JM: Эволюционные отношения и структурные механизмы белков AAA +. Annu Rev Biophys Biomol Struct. 2006, 35: 93-114. 10.1146 / annurev.biophys.35.040405.101933.
PubMed CAS Google Scholar
Джерузалми Д., Юрьева О, Чжао Ю., Янг М., Стюарт Дж., Хингорани М., О’Доннелл М., Куриян Дж .: Механизм открывания зажима процессивности ключом дельта-субъединицы комплекса загрузчика зажима ДНК-полимеразы III E. coli. Клетка. 2001, 106: 417-428. 10.1016 / S0092-8674 (01) 00462-7.
PubMed CAS Google Scholar
Ellison V, Stillman B: Открытие зажима: интимный вид на биологическую машину, управляемую АТФ. Клетка.2001, 106: 655-660. 10.1016 / S0092-8674 (01) 00498-6.
PubMed CAS Google Scholar
Бердис А.Дж., Бенкович С.Дж.: Механизм сборки холофермента ДНК бактериофага Т4: белок 44/62 действует как молекулярный двигатель. Биохимия. 1997, 36: 2733-2743. 10.1021 / bi962139l.
PubMed CAS Google Scholar
Goedken ER, Levitus M, Johnson A, Bustamante C, O’Donnell M, Kuriyan J: Измерения флуоресценции на E.coli ДНК-полимераза загрузчик зажима: значение для конформационных изменений во время связывания АТФ и зажима. J Mol Biol. 2004, 336: 1047-1059. 10.1016 / j.jmb.2003.12.074.
PubMed CAS Google Scholar
Bourne HR, Sanders DA, McCormick F: Суперсемейство GTPase: консервативный переключатель для различных функций клеток. Природа. 1990, 348: 125-132. 10.1038 / 348125a0.
PubMed CAS Google Scholar
Turner J, Hingorani MM, Kelman Z, O’Donnell M: Внутренняя работа машины с зажимом для ДНК-полимеразы. EMBO J. 1999, 18: 771-783. 10.1093 / emboj / 18.3.771.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Pietroni P, Young MC, Latham GJ, von Hippel PH: Структурный анализ взаимодействий скользящего зажима gp45 во время сборки холофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. I. Конформационные изменения в комплексе gp44 / 62-gp45-ATP во время клэмп-нагрузки.J Biol Chem. 1997, 272: 31666-31676. 10.1074 / jbc.272.50.31666.
PubMed CAS Google Scholar
Асон Б., Бертрам Дж. Г., Хингорани М. М., Бичем Дж. М., О’Доннелл М., Гудман М. Ф., Блум Л. Б.: Модель сборки голофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli на концах праймера / матрицы. ДНК запускает изменение специфичности связывания зажимного загрузчика гамма-комплекса. J Biol Chem. 2000, 275: 3006-3015. 10.1074 / jbc.275.4.3006.
PubMed CAS Google Scholar
Jarvis TC, Paul LS, Hockensmith JW, von Hippel PH: Структурные и ферментативные исследования системы репликации ДНК Т4. II. АТФазные свойства полимеразного вспомогательного белкового комплекса. J Biol Chem. 1989, 264: 12717-12729.
PubMed CAS Google Scholar
Gomes XV, Burgers PM: использование АТФ фактором репликации C. I. АТФ-опосредованное взаимодействие с ДНК и с ядерным антигеном пролиферирующих клеток. J Biol Chem.2001, 276: 34768-34775. 10.1074 / jbc.M011631200.
PubMed CAS Google Scholar
Goedken ER, Kazmirski SL, Bowman GD, O’Donnell M, Kuriyan J: Картирование взаимодействия ДНК с комплексом зажима-загрузчика ДНК-полимеразы Escherichia coli. Nat Struct Mol Biol. 2005, 12: 183-190. 10.1038 / nsmb889.
PubMed CAS Google Scholar
Hingorani MM, Bloom LB, Goodman MF, O’Donnell M: Разделение труда — последовательный гидролиз АТФ приводит в движение сборку скользящего зажима ДНК-полимеразы вокруг ДНК.EMBO J. 1999, 18: 5131-5144. 10.1093 / emboj / 18.18.5131.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Guenther B, Onrust R, Sali A, O’Donnell M, Kuriyan J: Кристаллическая структура дельта-субъединицы комплекса зажим-загрузчик ДНК-полимеразы III E. coli. Клетка. 1997, 91: 335-345. 10.1016 / S0092-8674 (00) 80417-1.
PubMed CAS Google Scholar
Johnson A, O’Donnell M: Заказанный гидролиз АТФ в машине AAA + с зажимом гамма-комплекса. J Biol Chem. 2003, 278: 14406-14413. 10.1074 / jbc.M212708200.
PubMed CAS Google Scholar
Johnson A, Yao NY, Bowman GD, Kuriyan J, O’Donnell M: Загрузчик зажима фактора репликации C требует датчиков пальца аргинина для управления связыванием ДНК и загрузкой ядерного антигена пролиферирующих клеток. J Biol Chem. 2006, 281: 35531-35543.10.1074 / jbc.M6060.
PubMed CAS Google Scholar
Ахмадиан М.Р., Стеге П., Шеффзек К., Виттинггофер А: Подтверждение гипотезы аргининового пальца для GAP-стимулированной реакции гидролиза Ras. Nat Struct Biol. 1997, 4: 686-689. 10.1038 / nsb0997-686.
PubMed CAS Google Scholar
Lia G, Michel B, Allemand J-F: полимеразный обмен во время синтеза фрагмента Окадзаки, наблюдаемый в живых клетках.Наука. 2011, 335: 328-331.
PubMed Google Scholar
Reyes-Lamothe R, Sherratt DJ, Leake MC: Стехиометрия и архитектура активного механизма репликации ДНК в Escherichia coli. Наука. 2010, 328: 498-501. 10.1126 / science.1185757.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Gulbis JM, Kazmirski SL, Finkelstein J, Kelman Z, O’Donnell M, Kuriyan J: Кристаллическая структура chi: psi субкомплекса зажим-загрузочного комплекса ДНК-полимеразы Escherichia coli.Eur J Biochem. 2004, 271: 439-449. 10.1046 / j.1432-1033.2003.03944.x.
PubMed CAS Google Scholar
Марсо А.Х., Банг С., Массони С.К., Джордж Н.П., Сандлер С.Дж., Марианс К.Дж., Кек Дж.Л .: Структура интерфейса SSB-ДНК-полимераза III и его роль в репликации ДНК. EMBO J. 2011, 30: 4236-4247. 10.1038 / emboj.2011.305.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Кельман З., Южаков А., Анджелкович Дж., О’Доннелл М: Посвящено отстающей цепи — субъединице ДНК-полимеразы III, холофермент контактирует с SSB, способствуя процессивному удлинению и сборке скользящего зажима. EMBO J. 1998, 17: 2436-2449. 10.1093 / emboj / 17.8.2436.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Гловер Б.П., МакГенри К.С.: Субъединицы хипси холофермента ДНК-полимеразы III связываются с одноцепочечным ДНК-связывающим белком (SSB) и способствуют репликации матрицы, покрытой SSB.J Biol Chem. 1998, 273: 23476-23484. 10.1074 / jbc.273.36.23476.
PubMed CAS Google Scholar
Андерсон С.Г., Уильямс С.Р., О’Доннелл М., Блум Л.Б.: функция для субъединицы psi при загрузке скользящего зажима ДНК-полимеразы Escherichia coli. J Biol Chem. 2007, 282: 7035-7045.
PubMed CAS Google Scholar
Simonetta KR, Kazmirski SL, Goedken ER, Cantor AJ, Kelch BA, McNally R, Seyedin SN, Makino DL, O’Donnell M, Kuriyan J: Механизм распознавания АТФ-зависимого шаблона праймера с помощью Зажим погрузочный комплекс.Клетка. 2009, 137: 659-671. 10.1016 / j.cell.2009.03.044.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Waga S, Stillman B: Анатомия репликационной вилки ДНК, выявленная при восстановлении репликации ДНК SV40 in vitro. Природа. 1994, 369: 207-212. 10.1038 / 369207a0.
PubMed CAS Google Scholar
Cullmann G, Fien K, Kobayashi R, Stillman B: Характеристика пяти генов фактора репликации C Saccharomyces cerevisiae.Mol Cell Biol. 1995, 15: 4661-4671.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Цуримото Т., Стилман Б. Факторы репликации, необходимые для репликации ДНК SV40 in vitro. I. Специфическое для структуры ДНК распознавание соединения праймер-матрица эукариотическими ДНК-полимеразами и их вспомогательными белками. J Biol Chem. 1991, 266: 1950-1960.
PubMed CAS Google Scholar
Bowman GD, O’Donnell M, Kuriyan J: Структурный анализ эукариотического скользящего комплекса загрузочного зажима-зажима ДНК. Природа. 2004, 429: 724-730. 10.1038 / природа02585.
PubMed CAS Google Scholar
Келч Б.А., Макино Д.Л., О’Доннелл М., Куриян Дж .: Как загрузчик зажима ДНК-полимеразы открывает скользящий зажим. Наука. 2011, 334: 1675-1680. 10.1126 / science.1211884.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Cann IK, Ishino Y: Репликация архейной ДНК: определение частей для решения головоломки. Генетика. 1999, 152: 1249-1267.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Мията Т., Сузуки Х., Ояма Т., Маянаги К., Ишино Ю., Морикава К.: структура открытого зажима в комплексе зажим-нагружение, визуализированная с помощью анализа изображений с помощью электронного микроскопа. Proc Natl Acad Sci USA. 2005, 102: 13795-13800. 10.1073 / pnas.0506447102.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Seybert A, Wigley DB: Определенные роли в связывании и гидролизе АТФ в отдельных субъединицах загрузчика зажимов архей. EMBO J. 2004, 23: 1360-1371. 10.1038 / sj.emboj.7600130.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Kazmirski SL, Zhao Y, Bowman GD, O’Donnell M, Kuriyan J: Движения вне плоскости в открытых скользящих зажимах: моделирование молекулярной динамики ядерного антигена эукариотических и архейных пролиферирующих клеток.Proc Natl Acad Sci USA. 2005, 102: 13801-13806. 10.1073 / pnas.0506430102.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Тайнер Дж., Маккаммон Дж. А., Иванов И. Распознавание состояния открытого кольца ядерного антигена пролиферирующих клеток с помощью фактора репликации C способствует зажиму эукариотических клеток. J Am Chem Soc. 2010, 132: 7372-7378. 10.1021 / ja100365x.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Adelman JL, Chodera JD, Kuo I-FW, Miller TF, Barsky D: Механические свойства PCNA: значение для нагрузки и функции скользящего зажима ДНК. Biophys J. 2010, 98: 3062-3069. 10.1016 / j.bpj.2010.03.056.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Georgescu RE, Yurieva O, Kim S-S, Kuriyan J, Kong X-P, O’Donnell M: Структура низкомолекулярного ингибитора скользящего зажима ДНК-полимеразы.Proc Natl Acad Sci USA. 2008, 105: 11116-11121. 10.1073 / pnas.0804754105.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Gulbis JM, Kelman Z, Hurwitz J, O’Donnell M, Kuriyan J: Структура C-концевой области p21 (WAF1 / CIP1) в комплексе с PCNA человека. Клетка. 1996, 87: 297-306. 10.1016 / S0092-8674 (00) 81347-1.
PubMed CAS Google Scholar
Burnouf DY, Olieric V, Wagner J, Fujii S, Reinbolt J, Fuchs RPP, Dumas P: Структурный и биохимический анализ взаимодействий скользящего зажима / лиганда предполагает конкуренцию между репликативными и транслезионными ДНК-полимеразами. J Mol Biol. 2004, 335: 1187-1197. 10.1016 / j.jmb.2003.11.049.
PubMed CAS Google Scholar
Berdis AJ, Soumillion P, Benkovic SJ: Карбоксильный конец ДНК-полимеразы бактериофага Т4 необходим для образования холоферментного комплекса.Proc Natl Acad Sci USA. 1996, 93: 12822-12827. 10.1073 / пнас.93.23.12822.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Latham GJ, Bacheller DJ, Pietroni P, von Hippel PH: Структурный анализ взаимодействий скользящего зажима gp45 во время сборки голофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. III. ДНК-полимераза Gp43 связывается с той же стороной скользящего зажима, что и загрузочный зажим. J Biol Chem. 1997, 272: 31685-31692.10.1074 / jbc.272.50.31685.
PubMed CAS Google Scholar
Naktinis V, Turner J, O’Donnell M: молекулярный переключатель в репликационной машине, определяемый внутренней конкуренцией за белковые кольца. Клетка. 1996, 84: 137-145. 10.1016 / S0092-8674 (00) 81000-4.
PubMed CAS Google Scholar
Leu FP, O’Donnell M: Взаимодействие субъединиц загрузчика зажима в раскрытии бета-скользящего зажима холофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli.J Biol Chem. 2001, 276: 47185-47194. 10.1074 / jbc.M106780200.
PubMed CAS Google Scholar
Young MC, Reddy MK, von Hippel PH: Структура и функция голофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. Биохимия. 1992, 31: 8675-8690. 10.1021 / bi00152a001.
PubMed CAS Google Scholar
Раш Дж., Лин Т.К., Хиноны М., Спайсер Е.К., Дуглас И., Уильямс К.Р., Кенигсберг WH: субъединица 44P комплекса дополнительных белков ДНК-полимеразы Т4 катализирует гидролиз АТФ.J Biol Chem. 1989, 264: 10943-10953.
PubMed CAS Google Scholar
Dohrmann PR, McHenry CS: Двустороннее взаимодействие полимеразы и фактора процессивности: только внутренний бета-связывающий сайт альфа-субъединицы необходим для процессивной репликации голоферментом ДНК-полимеразы III. J Mol Biol. 2005, 350: 228-239. 10.1016 / j.jmb.2005.04.065.
PubMed CAS Google Scholar
López de Saro FJ, Georgescu RE, O’Donnell M: Пептидный переключатель регулирует процессивность ДНК-полимеразы. Proc Natl Acad Sci USA. 2003, 100: 14689-14694. 10.1073 / pnas.2435454100.
PubMed PubMed Central Google Scholar
Индиани К., Макинерни П., Джорджеску Р., Гудман М. Ф., О’Доннелл М.: Инструментальная лента со скользящим зажимом связывает ДНК-полимеразы с высокой и низкой точностью одновременно. Mol Cell. 2005, 19: 805-815. 10.1016 / j.molcel.2005.08.011.
PubMed CAS Google Scholar
Янг Дж, Чжуанг З., Рокказекка Р.М., Тракселис М.А., Бенкович С.Дж .: Динамическая процессивность ДНК-полимеразы Т4 во время репликации. Proc Natl Acad Sci USA. 2004, 101: 8289-8294. 10.1073 / pnas.0402625101.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Битти Т.Р., Белл С.Д.: Координация множественных ферментативных активностей с помощью одного PCNA при созревании архейного фрагмента Окадзаки.EMBO J. 2012, 31: 1556-1567. 10.1038 / emboj.2012.12.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Trakselis MA, Alley SC, Abel-Santos E, Benkovic SJ: Создание динамической картины скользящего зажима во время сборки холофермента ДНК-полимеразы Т4 с использованием флуоресцентного резонансного переноса энергии. Proc Natl Acad Sci USA. 2001, 98: 8368-8375. 10.1073 / pnas.111006698.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Миллар Д., Тракселис М.А., Бенкович С.Дж.: О структуре решения скользящего зажима Т4 (gp45). Биохимия. 2004, 43: 12723-12727. 10.1021 / bi048349c.
PubMed CAS Google Scholar
Alley SC, Shier VK, Abel-Santos E, Sexton DJ, Soumillion P, Benkovic SJ: Скользящий зажим полимеразы бактериофага T4 имеет открытые и закрытые интерфейсы субъединиц в растворе. Биохимия. 1999, 38: 7696-7709. 10.1021 / bi9827971.
PubMed CAS Google Scholar
Alley SC, Abel-Santos E, Benkovic SJ: Отслеживание открытия и закрытия скользящего зажима во время сборки холофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. Биохимия. 2000, 39: 3076-3090. 10.1021 / bi992377r.
PubMed CAS Google Scholar
Yao N, Turner J, Kelman Z, Stukenberg PT, Dean F, Shechter D, Pan ZQ, Hurwitz J, O’Donnell M: зажимное нагружение, разгрузка и внутренняя стабильность PCNA, бета и gp45 скольжения зажимы человека, E.coli и репликазы Т4. Гены Клетки. 1996, 1: 101-113. 10.1046 / j.1365-2443.1996.07007.x.
PubMed CAS Google Scholar
Hingorani MM, O’Donnell M: Связывание АТФ с загрузчиком зажима Escherichia coli приводит к открытию кольцевого зажима холофермента ДНК-полимеразы III. J Biol Chem. 1998, 273: 24550-24563. 10.1074 / jbc.273.38.24550.
PubMed CAS Google Scholar
Paschall CO, Thompson JA, Marzahn MR, Chiraniya A, Hayner JN, O’Donnell M, Robbins AH, McKenna R, Bloom LB: Загрузчик зажима Escherichia coli может активно открывать β-скользящий зажим. J Biol Chem. 2011, 286: 42704-42714. 10.1074 / jbc.M111.268169.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Наики Т., Кондо Т., Накада Д., Мацумото К., Сугимото К.: Chl12 (Ctf18) образует новый комплекс, связанный с фактором репликации C, и функционирует избыточно с Rad24 в пути контрольной точки репликации ДНК.Mol Cell Biol. 2001, 21: 5838-5845. 10.1128 / MCB.21.17.5838-5845.2001.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Mayer ML, Gygi SP, Aebersold R, Hieter P: Идентификация RFC (Ctf18p, Ctf8p, Dcc1p): альтернативный комплекс RFC, необходимый для сцепления сестринских хроматид у S. cerevisiae. Mol Cell. 2001, 7: 959-970. 10.1016 / S1097-2765 (01) 00254-4.
PubMed CAS Google Scholar
Bylund GO, Burgers PMJ: Репликационный белок А-направленная разгрузка PCNA комплексом установления когезии Ctf18. Mol Cell Biol. 2005, 25: 5445-5455. 10.1128 / MCB.25.13.5445-5455.2005.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
OYu F, Salazar M, Reid BR: Структура гибридного дуплекса ДНК: РНК. Почему РНКаза Н не расщепляет чистую РНК. J Mol Biol. 1993, 233: 509-523. 10.1006 / jmbi.1993.1528.
Google Scholar
Zhuang Z, Yoder BL, Burgers PMJ, Benkovic SJ: Структура комплекса ядерного антигена репликации фактора C с разомкнутым кольцом пролиферирующих клеток, выявленная с помощью передачи энергии флуоресценции. Proc Natl Acad Sci USA. 2006, 103: 2546-2551. 10.1073 / pnas.0511263103.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Ason B, Handayani R, Williams CR, Bertram JG, Hingorani MM, O’Donnell M, Goodman MF, Bloom LB: Механизм загрузки скользящего зажима ДНК-полимеразы III бета Escherichia coli на ДНК.Добросовестный праймер / шаблоны предпочтительно запускают гамма-комплекс для гидролиза АТФ и нагрузки зажима. J Biol Chem. 2003, 278: 10033-10040. 10.1074 / jbc.M211741200.
PubMed CAS Google Scholar
Бердис А.Дж., Бенкович С.Дж .: Роль гидролиза аденозин-5′-трифосфата в сборке холоферментного комплекса репликации ДНК бактериофага Т4. Биохимия. 1996, 35: 9253-9265. 10.1021 / bi952569w.
PubMed CAS Google Scholar
Gomes XV, Schmidt SL, Burgers PM: использование АТФ фактором репликации дрожжей C. II. Чтобы загрузить ядерный антиген пролиферирующих клеток на примированную ДНК, требуется несколько этапов связывания АТФ. J Biol Chem. 2001, 276: 34776-34783. 10.1074 / jbc.M011743200.
PubMed CAS Google Scholar
Neuwald AF: Байесовские тени молекулярных механизмов, брошенные в свете эволюции. Trends Biochem Sci. 2006, 31: 374-382.10.1016 / j.tibs.2006.05.002.
PubMed CAS Google Scholar
Zhang X, Wigley DB: «глутаматный переключатель» обеспечивает связь между активностью АТФазы и связыванием лиганда в белках AAA +. Nat Struct Mol Biol. 2008, 15: 1223-1227. 10.1038 / nsmb.1501.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Пьетрони П., фон Хиппель PH: Множественное связывание АТФ требуется для стабилизации «активированного» (зажим открытого) зажимного загрузчика комплекса репликации ДНК Т4.J Biol Chem. 2008, 283: 28338-28353. 10.1074 / jbc.M804371200.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Yao NY, Johnson A, Bowman GD, Kuriyan J, O’Donnell M: Механизм раскрытия зажима ядерного антигена пролиферирующих клеток фактором репликации C. J Biol Chem. 2006, 281: 17528-17539. 10.1074 / jbc.M601273200.
PubMed CAS Google Scholar
Сакато М., О’Доннелл М., Хингорани М.М.: Центральная точка поворота в загрузчике зажимов RFC контролирует открытие PCNA и загрузку ДНК. J Mol Biol. 2011, 416: 163-175.
PubMed PubMed Central Google Scholar
Wieczorek A, Downey CD, Dallmann HG, McHenry CS: Только одна АТФ-связывающая субъединица DnaX требуется для инициирования образования комплекса голоэнзимом ДНК-полимеразы III Escherichia coli. J Biol Chem. 2010, 285: 29049-29053.10.1074 / jbc.C110.165076.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Schmidt SL, Gomes XV, Burgers PM: использование АТФ фактором репликации дрожжей C. III. АТФ-связывающие домены Rfc2, Rfc3 и Rfc4 необходимы для распознавания ДНК и загрузки зажима. J Biol Chem. 2001, 276: 34784-34791. 10.1074 / jbc.M011633200.
PubMed CAS Google Scholar
Sexton DJ, Kaboord BF, Berdis AJ, Carver TE, Benkovic SJ: Анализ порядка сборки холофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. Биохимия. 1998, 37: 7749-7756. 10.1021 / bi980088h.
PubMed CAS Google Scholar
Тракселис М.А., Бердис А.Дж., Бенкович С.Дж.: Исследование роли зажим-загрузчика и гидролиза АТФ в образовании холофермента полимеразы бактериофага Т4. J Mol Biol. 2003, 326: 435-451.10.1016 / S0022-2836 (02) 01330-Х.
PubMed CAS Google Scholar
Pietroni P, Young MC, Latham GJ, von Hippel PH: Рассечение АТФ-управляемого реакционного цикла системы загрузки зажима процессивности репликации ДНК бактериофага Т4. J Mol Biol. 2001, 309: 869-891. 10.1006 / jmbi.2001.4687.
PubMed CAS Google Scholar
Бернштейн Х., Бернштейн С: генетическая гомология бактериофага Т4 с бактериями и эукариотами.J Bacteriol. 1989, 171: 2265-2270.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Zhou ZH, Dougherty M, Jakana J, He J, Rixon FJ, Chiu W: Наблюдение за капсидом вируса герпеса при 8,5 A. Наука. 2000, 288: 877-880. 10.1126 / science.288.5467.877.
PubMed CAS Google Scholar
Fokine A, Leiman PG, Shneider MM, Ahvazi B, Boeshans KM, Steven AC, Black LW, Mesyanzhinov VV, Rossmann MG: Структурное и функциональное сходство между капсидными белками бактериофагов T4 и HK97 указывает на общий происхождение.Proc Natl Acad Sci USA. 2005, 102: 7163-7168. 10.1073 / pnas.0502164102.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Bamford DH, Grimes JM, Stuart DI: Что структура говорит нам об эволюции вируса ?. Curr Opin Struct Biol. 2005, 15: 655-663. 10.1016 / j.sbi.2005.10.012.
PubMed CAS Google Scholar
Смитс С., Чечик М., Ковалевский О.В., Шевцов М.Б., Фостер А.В., Алонсо Дж. К., Антсон А.А.: Структурные основы нуклеазной активности большой терминазы бактериофага.EMBO Rep. 2009, 10: 592-598. 10.1038 / embor.2009.53.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Надаль М., Мас П.Дж., Мас П.Дж., Бланко А.Г., Арнан С., Сола М., Харт Д.Дж., Колл М. Структура и ингибирование нуклеазного домена терминирования упаковки ДНК герпесвируса. Proc Natl Acad Sci USA. 2010, 107: 16078-16083. 10.1073 / pnas.1007144107.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Iyer LM, Balaji S, Koonin EV, Aravind L: Эволюционная геномика нуклео-цитоплазматических больших ДНК-вирусов. Virus Res. 2006, 117: 156-184. 10.1016 / j.virusres.2006.01.009.
PubMed CAS Google Scholar
Filée J: Боковой перенос генов, клон-специфическая экспансия генов и эволюция ядерно-цитоплазматических больших ДНК-вирусов. J Invertebr Pathol. 2009, 101: 169-171. 10.1016 / j.jip.2009.03.010.
PubMed Google Scholar
Джерузалми Д., О’Доннелл М., Куриян Дж .: Кристаллическая структура гамма (гамма) комплекса загрузчика процессивного зажима ДНК-полимеразы III E. coli. Клетка. 2001, 106: 429-441. 10.1016 / S0092-8674 (01) 00463-9.
PubMed CAS Google Scholar
Ротвелл П.Дж., Ваксман Г.: Структура и механизм ДНК-полимераз. Adv Protein Chem. 2005, 71: 401-440.
PubMed CAS Google Scholar
Bailey S, Wing RA, Steitz TA: Структура ДНК-полимеразы III T. aquaticus отличается от эукариотических репликативных ДНК-полимераз. Клетка. 2006, 126: 893-904. 10.1016 / j.cell.2006.07.027.
PubMed CAS Google Scholar
Ламерс М. Х., Джорджеску Р. Е., Ли С.-Дж., О’Доннелл М., Куриян Дж .: Кристаллическая структура каталитической альфа-субъединицы репликативной ДНК-полимеразы III E. coli. Клетка. 2006, 126: 881-892. 10.1016 / j.cell.2006.07.028.
PubMed CAS Google Scholar
Mueser TC, Hinerman JM, Devos JM, Boyer RA, Williams KJ: Структурный анализ репликации ДНК бактериофага T4: обзор бактериофага T4 и его родственников в серии Virology Journal. Virol J. 2010, 7: 359-10.1186 / 1743-422X-7-359.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Bouché JP, Zechel K, Kornberg A: продукт гена dnaG, резистентная к рифампицину РНК-полимераза, инициирует преобразование одноцепочечной ДНК колифага в ее дуплексную репликативную форму. J Biol Chem. 1975, 250: 5995-6001.
PubMed Google Scholar
Викнер S: ДНК или РНК-праймирование синтеза ДНК бактериофага G4 белком dnaG Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci USA. 1977, 74: 2815-2819. 10.1073 / pnas.74.7.2815.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Роуэн Л., Корнберг А: Примаза, белок dnaG кишечной палочки. Фермент, запускающий цепочки ДНК. J Biol Chem. 1978, 253: 758-764.
PubMed CAS Google Scholar
Ильина Т.В., Горбаленя А.Е., Кунин Е.В.: Организация и эволюция бактериальных и бактериофаговых примазно-геликазных систем.J Mol Evol. 1992, 34: 351-357. 10.1007 / BF00160243.
PubMed CAS Google Scholar
Подобник М., МакИнерни П., О’Доннелл М., Куриян Дж.: Домен TOPRIM в кристаллической структуре каталитического ядра примазы Escherichia coli подтверждает структурную связь с топоизомеразами ДНК. J Mol Biol. 2000, 300: 353-362. 10.1006 / jmbi.2000.3844.
PubMed CAS Google Scholar
Кек Дж. Л., Рош Д. Д., Линч А. С., Бергер Дж. М.: Структура РНК-полимеразного домена примазы E. coli. Наука. 2000, 287: 2482-2486. 10.1126 / science.287.5462.2482.
PubMed CAS Google Scholar
Корнберг А., Бейкер Т.А.: Репликация ДНК. 1992, Университетские научные книги
Google Scholar
Conaway RC, Lehman IR: Активность ДНК-примазы, связанная с ДНК-полимеразой альфа из эмбрионов Drosophila melanogaster.Proc Natl Acad Sci USA. 1982, 79: 2523-2527. 10.1073 / pnas.79.8.2523.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Кельман З., Ли Дж. К., Гурвиц Дж. Единственный поддерживающий белок минихромосомы Methanobacterium thermoautotrophicum DeltaH содержит ДНК-геликазную активность. Proc Natl Acad Sci USA. 1999, 96: 14783-14788. 10.1073 / pnas.96.26.14783.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Мойер С.Е., Льюис П.В., Ботчан М.Р.: Выделение комплекса Cdc45 / Mcm2-7 / GINS (CMG), кандидата на геликазу вилки репликации эукариотической ДНК. Proc Natl Acad Sci USA. 2006, 103: 10236-10241. 10.1073 / pnas.0602400103.
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
Bochman ML, Schwacha A: Комплекс Mcm2-7 обладает геликазной активностью in vitro. Mol Cell. 2008, 31: 287-293. 10.1016 / j.molcel.2008.05.020.
PubMed CAS Google Scholar
Ильвес И., Петоевич Т., Песавенто Дж. Дж., Ботчан М.Р.: Активация геликазы MCM2-7 путем ассоциации с белками Cdc45 и GINS. Mol Cell. 2010, 37: 247-258. 10.1016 / j.molcel.2009.12.030.
PubMed CAS Google Scholar
Mosig G, Macdonald P: новый мембранно-связанный белок репликации ДНК, продукт гена 69 бактериофага T4, имеет участок гомологии с белком dnaA Escherichia coli. J Mol Biol.1986, 189: 243-248. 10.1016 / 0022-2836 (86) -5.
PubMed CAS Google Scholar
Казмирски С.Л., Подобник М., Вейтце Т.Ф., О’Доннелл М., Курьян Дж .: Структурный анализ неактивного состояния комплекса зажим-загрузчик ДНК-полимеразы Escherichia coli. Proc Natl Acad Sci USA. 2004, 101: 16750-16755. 10.1073 / pnas.0407
PubMed CAS PubMed Central Google Scholar
PHYLIP: [http://evolution.genetics.washington.edu/phylip.html]
Зажимы для поперечины LockNLoad (комплект из двух) — Якима
- Подробнее о продукте
- Установка
- Принадлежности
- Запасные части
Подробнее о продукте
Зажимы для поперечин LockNLoad (комплект из двух)
Подробнее о продукте
- Продается в виде набора из 2 зажимов с оборудованием для крепления к одной поперечине.
- Платформа LockNLoad ™ требует 2 или 3 комплекта зажимов поперечины (проверьте требования к установке вашего автомобиля и платформы на предмет необходимого количества зажимов поперечины).
- Сварная стальная конструкция для прочности.
- Резиновые накладки защищают отделку перекладины.
- Совместим со всеми поперечинами Yakima®, а также со многими другими поперечинами вторичного рынка, заводскими поперечинами и 2-дюймовыми круглыми или квадратными трубками.
- Каждый набор поперечных зажимов увеличивает грузоподъемность 110 фунтов, до 330 фунтов.при использовании с 3 наборами хомутов. Никогда не превышайте предельный вес, указанный компанией Yakima или производителем для вашего автомобиля.
Технические характеристики
- Вес: 1,86 фунта.
- Размеры: Д 2,75 дюйма x Ш 1,80 дюйма x В 1,00 дюйма
Характеристики продукта Видео
Установка
Зажимы для поперечин LockNLoad (комплект из двух)
Видео установки
Принадлежности
Добавьте аксессуары в стойку
Запасные части
Не волнуйтесь, у нас есть запасной
4178844811312
30_Доступно40_Пригодно50_Приемлемо60_Доступно
Используйте стрелки влево / вправо для навигации по слайд-шоу или проводите пальцем влево / вправо при использовании мобильного устройства
Лабораторная оценка лапароскопических сосудистых зажимов с использованием тензодатчика — все ли зажимы одинаковы?
Цель: Использование эффективных сосудистых зажимов является ключом к успешной лапароскопической частичной нефрэктомии.Основываясь на нашем клиническом опыте, окклюзионные возможности сосудистых зажимов весьма различны. Мы сравнили окклюзионную силу доступных в настоящее время лапароскопических сосудистых зажимов.
Материалы и методы: Усилие зажима 3 лапароскопических сосудистых зажимов (Aesculap®, Klein Surgical Systems, Сан-Антонио, Техас и марка Karl Storztrade) измерялось зажимом 2.Датчик нагрузки сжатия 2 мм (интерфейс Advanced Force Measurement, Скоттсдейл, Аризона) в фунтах силы. Испытывали следующие переменные: ручные зажимы Satinsky, DeBakey и Storz по сравнению с зажимами Bulldog, проксимальное, среднее и дистальное положение приложения, новые и бывшие в употреблении зажимы Bulldog и новые и бывшие в употреблении ручные зажимы Satinsky. Кроме того, ручные зажимы были испытаны в соответствии с силой, создаваемой выемками в запирающем механизме. Сохранение силы также определяли для всех инструментов после пережатия латексного резинового катетера 20Fr в течение часа.Наконец, исследования давления утечки были выполнены с использованием собранной свиной артерии для определения взаимосвязи между силой челюсти и давлением утечки в мм рт.ст. ручных зажимов Bulldog и Satinsky с использованием манометра (Cole-Parmer (R)).
Результаты: Ручные сосудистые зажимы обеспечивали большую силу, чем зажимы типа «бульдог». Ближайшее к шарниру проксимальное положение обеспечивает наибольшую силу для всех инструментов.По сравнению с новыми зажимами, зажимы-бульдоги Klein Surgical Systems 2-летней давности показали снижение силы зажима более чем на 40% во всех положениях, тогда как зажимы-зажимы Aesculap 3-летнего возраста вообще уменьшили усилие зажима менее чем на 9%. позиции. Двухлетние ручные зажимы Satinsky показали уменьшение на 20%, 9% и 0% в дистальной, средней и проксимальной позициях челюсти соответственно. Кроме того, наблюдалась положительная корреляция между силой и количеством зазубрин в ручных зажимах. Кроме того, все инструменты сохранили силу зажима после 1 часа непрерывного зажима.Наконец, исследования давления утечки, проведенные с использованными зажимами, показали, что ручные зажимы Klein Surgical Systems Bulldog, Aesculap Bulldog и Satinsky протекали при давлении от 153 до 223, от 465 до 795 и от 1500 до 2600 мм рт.
Выводы: Сосудистые зажимы имеют различные окклюзионные силы в зависимости от типа зажима, производителя, характеристик челюсти и зубов, положения зажима челюсти и продолжительности использования.Однако для всех зажимов сила зажима была наибольшей в проксимальном положении. Это наиболее важно при применении лапароскопических зажимов типа «бульдог». Напротив, все ручные сосудистые зажимы создавали более высокую силу, чем интракорпоральные зажимы типа «бульдог». В 1 делении ручные сосудистые зажимы обеспечивали супрафизиологическую силу окклюзии независимо от положения или производителя.
Погрузочные зажимы для репликации и ремонта ДНК
Ремонт ДНК (Amst).Авторская рукопись; доступно в PMC 1 мая 2010 г. 32610-0245
Линда Б. Блум, Департамент биохимии и молекулярной биологии, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида 32610-0245;
Контактная информация: электронная почта: ude.lfu@moolbl, телефон: (352) 392-8708, факс: (352) 392-6511 Окончательная отредактированная версия этой статьи доступна на сайте DNA Repair (Amst). См. Другие статьи в PMC, которые цитировать опубликованную статью.Abstract
Скользящие зажимы и загрузочные устройства изначально были определены как факторы процессивности ДНК-полимеразы. Скользящие зажимы представляют собой кольцевые белковые комплексы, которые окружают дуплексную ДНК и скользят по ней, а загрузчики зажимов — это ферменты, которые загружают эти зажимы на ДНК. При связывании со скользящим зажимом ДНК-полимеразы остаются прочно связанными с копируемой матрицей, но способны перемещаться вдоль ДНК со скоростью, ограниченной скоростью включения нуклеотидов. Для многих различных ферментов, необходимых для репликации и восстановления ДНК, используются скользящие зажимы.Зажимы не только увеличивают процессивность этих ферментов, но также могут служить точкой прикрепления для координации активности ферментов, необходимых для данного процесса. Загрузчики зажимов являются членами семейства АТФаз AAA + и используют энергию связывания и гидролиза АТФ, чтобы катализировать механическую реакцию загрузки зажимов на ДНК. Многие конструктивные и функциональные особенности зажимов и погрузчиков зажимов сохраняются во всех сферах жизнедеятельности. Здесь механизм загрузки зажима рассматривается путем сравнения характеристик прокариотических и эукариотических зажимов и загрузчиков зажимов.
1. Введение
Скользящие зажимы и загрузочные устройства зажимов являются важными компонентами механизмов репликации и репарации ДНК. Скользящие зажимы представляют собой кольцевые комплексы белковых субъединиц, которые окружают и скользят по дуплексной ДНК [1,2]. Благодаря этим свойствам белки, которые связывают скользящие зажимы, остаются тесно связанными с ДНК, но способны перемещаться по дуплексам. Скользящие зажимы и загрузочные зажимы были впервые определены как факторы удлинения, необходимые для репликации ДНК [3].При связывании со скользящим зажимом процессивность репликативной ДНК-полимеразы увеличивается с десятков до тысяч нуклеотидов. Другие ДНК-полимеразы, включая те, которые необходимы для синтеза трансфузии и репарации ДНК, также используют скользящие зажимы. Существуют доказательства, подтверждающие модель «поясного ремня» [4], согласно которой скользящие зажимы координируют активность репликативной и трансфузионной полимераз, связываясь одновременно с ними, так что, когда репликативная полимераза останавливается в поражении, транслезионная полимераза присутствует для синтеза ДНК. мимо очага поражения [5].С момента своего первоначального открытия в качестве факторов процессивности полимеразы скользящие зажимы были обнаружены во всех сферах жизни, и теперь известно, что они участвуют во многих других аспектах метаболизма ДНК (обзор в [6,7]). Некоторые примеры других белков, которые связывают скользящие зажимы, включают эндонуклеазу лоскута I [8-10] и ДНК-лигазу I [11-13], которые участвуют в созревании фрагментов Okazaki и эксцизионной репарации оснований; Гомологи MutS и MutL [14–19] необходимы для репарации несоответствия; ДНК-гликозилазы [20–23], инициирующие эксцизионную репарацию оснований; и ДНК-метилтрансфераза 1 [24] и фактор сборки хроматина 1 [25], которые модифицируют и собирают ДНК в хроматин после репликации.Зажимы могут повысить эффективность этой разнообразной группы ферментов, привязывая их к ДНК, или, альтернативно, зажимы могут координировать активность ферментов для данного процесса, помогая рекрутировать серию ферментов в конкретный участок ДНК, или зажимы могут делать и то, и другое.
Скользящие зажимы не собираются спонтанно на геномной ДНК, а должны быть загружены. Мультисубъединичные загрузчики зажимов катализируют сборку зажимов на ДНК в АТФ-зависимой реакции. Как и в случае с зажимами, погрузчики зажимов от разных организмов имеют большое структурное и функциональное сходство.Загрузчики зажимов из бактерий, эукариот и даже бактериофага Т4 содержат пять ядерных субъединиц, которые являются членами семейства АТФаз AAA + и содержат консервативные мотивы последовательностей, необходимые для связывания и гидролиза АТФ. Хотя детали механизмов могут несколько отличаться, загрузчики зажимов используют энергию, связанную со связыванием и гидролизом АТФ, чтобы способствовать конформационным изменениям внутри комплекса загрузчиков зажимов. Эти конформационные изменения модулируют связывание с зажимом и ДНК и позволяют загрузчикам зажима катализировать реакцию механической нагрузки зажима.Основное внимание в этом обзоре будет уделено механизму нагружения зажимов, выявленному в результате структурных и биохимических исследований зажимов и загрузчиков зажимов с основным акцентом на сравнении и сопоставлении зажимов и загрузчиков зажимов эукариот и E. coli .
2. 1. Конструктивные особенности скользящих зажимов
Сохранены многие конструктивные особенности скользящих зажимов. Большинство зажимов состоит из трех субъединиц, расположенных кольцом. Эукариотический зажим, ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA) [26,27], зажимы gp45 из бактериофага T4 [28] и близкородственный бактериофаг RB69 [29], а также большинство зажимов PCNA архей [30] являются гомотримерами.Однако по крайней мере один вид архебактерий, Sulfolobus solfataricus, [31], использует гетеротримерный зажим. Бактериальные зажимы, такие как скользящий зажим E. coli β, представляют собой гомодимеры кольцевой формы [1,32]. Несмотря на то, что скользящий зажим E. coli (β) имеет только две субъединицы и имеет небольшую гомологию последовательностей с эукариотическим скользящим зажимом, общие структуры β-зажима и PCNA весьма схожи. Каждый зажим состоит из шести глобулярных доменов, организованных в кольцо в основном за счет нековалентных взаимодействий между соседними доменами ().Пептидные петли на внешнем крае колец ковалентно связывают глобулярные домены с образованием отдельных субъединиц. Для тримерных зажимов, таких как PCNA, одна субъединица образуется путем ковалентного связывания двух доменов, а для димерных зажимов, таких как β, три домена связаны с образованием субъединицы. Таким образом, PCNA содержит три междоменных интерфейса, а β содержит два, которые взаимодействуют только через нековалентные связи и которые могут быть открыты, чтобы позволить ДНК пройти в центр кольца.
Конструктивные особенности скользящих зажимовСхемы лент E.β-фиксатор coli (левая панель), человеческий PCNA (центральная панель) и бактериофаг RB69 gp45 (правая панель) показаны с каждой субъединицей другим цветом. Под схемами лент находятся рисунки, иллюстрирующие основные конструктивные особенности зажимов. Каждый зажим состоит из шести глобулярных доменов, которые расположены в кольцо и взаимодействуют в основном посредством нековалентных взаимодействий. Пептидные линкеры на внешней стороне колец ковалентно соединяют глобулярные домены в мономерные субъединицы. В β три глобулярных домена ковалентно соединены пептидными линкерами с образованием мономера, а в PCNA и gp45 два домена ковалентно связаны с образованием мономера.Структуры были созданы из файлов PDB 2POL [1], 1AXC [26] и 1B77 [29] для β, PCNA и gp45, соответственно, с использованием PyMol от DeLano Scientific LLC.
Отдельные подузлы внутри зажима расположены по типу «голова к хвосту», что придает зажимам ось вращения симметрии через центр и, что важно, разные передние и задние поверхности. В принципе, скользящие зажимы могут связывать белки как на передней, так и на задней стороне для координации активности ферментов. Однако все белки, которые, как показано, связывают скользящие зажимы, взаимодействуют с одной и той же стороной через консервативный мотив пептидной последовательности.Ключевой особенностью мотивов связывания зажимов как у прокариот, так и у эукариот является присутствие гидрофобных аминокислотных остатков, включая Phe, которые связываются с гидрофобным карманом на одной стороне зажимов [26,33,34]. На основе выравнивания последовательностей и исследований связывания были предложены консенсусные связывающие последовательности QL (S / D) LF [35] и QxxL (x) F [36] для β-зажима E. coli . Сходная консенсусная последовательность Qxx (I / L / M) xxF (F / Y) была предложена для белков, которые взаимодействуют с PCNA [37,38]. Зажимы содержат один связывающий карман на мономер, PCNA — три, а β-зажим — два.Несмотря на наличие нескольких связывающих карманов, загрузчик зажима и репликативная полимераза не могут связывать зажим одновременно из-за стерических эффектов. Загрузчик зажима должен отсоединиться от зажима, прежде чем ДНК-полимераза сможет связываться.
2. 2. Конструктивные особенности погрузчиков зажимов
Загрузчики зажимов — это молекулярные машины, которые катализируют физическую реакцию сборки зажимов на ДНК. Эти ферменты являются частью семейства ААА + АТФаз, которые используют энергию, полученную в результате связывания и гидролиза АТФ, для ускорения механических реакций, которые они катализируют (см. Обзор [39–43]).Функциональное ядро фиксаторов-загрузчиков состоит из пяти структурно гомологичных субъединиц [33,44,45], каждая из которых содержит три домена, соединенных гибкими линкерами (). N-концевые домены (I и II) имеют общую гомологию с членами семейства AAA + АТФаз, а C-концевой домен (III) уникален для зажимных загрузчиков. Эти пять субъединиц организованы в кольцо за счет тесных взаимодействий между С-концевыми доменами (). N-концевые домены I и II неплотно упакованы, как если бы они были подвешены на «воротнике», образованном C-концевыми доменами, и на N-концевой стороне имеется большое отверстие.Структура зажимов-загрузчиков в некоторой степени аналогична руке, где С-концевые домены собраны в ладонь, а N-концевые домены представлены пальцами. Гибкие линкеры в отдельных субъединицах обеспечивают конформационную гибкость и позволяют доменам перемещаться относительно друг друга, как пальцы могут сгибаться в суставах. Чтобы упростить номенклатуру при сравнении загрузчиков с зажимами разных видов, пять субъединиц загрузочных устройств с зажимами будут обозначаться как субъединицы A — E () в зависимости от их положения в кольце (например,г. RFC-A).
Структурные особенности зажимных загрузчиковA) Показаны ленточные диаграммы D-субъединиц из S. cerevisiae RFC (верхняя панель) и E. coli γ комплекса (нижняя панель) со связанным ATPγS (желтые сферы). . Субъединицы ориентированы так, что С-концевой домен III находится наверху. B) Показаны ленточные диаграммы загрузчиков с зажимом ядра из пяти субъединиц, S. cerevisiae RFC (верхняя панель) и E. coli γ 3 δδ ′ (нижняя панель).RFC рассматривает «воротник», образованный С-концевыми доменами (III). Вид зажимного загрузчика E. coli повернут на 90 ° относительно RFC, так что воротник, образованный С-концевыми доменами (III), находится наверху структуры. С этой точки зрения можно видеть плотную упаковку C-концевых доменов относительно N-концевых доменов и разрыв между A- и E-субъединицами. Связанный ATPγS показан серыми сферами. Субъединица A в структуре RFC была усечена для кристаллографии до остатков 295 — 785 (из 861), а другие субъединицы являются полноразмерными.Субъединицы γ усечены до остатков 1-373 (из 431). C) Мультяшные диаграммы, иллюстрирующие расположение пяти основных субъединиц у эукариотических и клещевых загрузчиков E. coli . Субблоки обозначаются буквами A — E для сравнения загрузчиков зажимов разных видов. Также дана номенклатура субъединиц, а для RFC даны обозначения как дрожжей (Rfc1-5), так и человека (например, p140). Все ленточные диаграммы были созданы из файлов PDB 1SXJ [33] и 1XXH [44] для дрожжей и E.coli , соответственно, с использованием PyMol от DeLano Scientific LLC.
Пятисубъединичное ядро зажимного загрузчика E. coli состоит из трех разных белков, трех копий белка DnaX и одной субъединицы δ и δ ‘, расположенных так, что δ занимает положение A, δ ′ положение E, и белки DnaX в положениях B, C и D (). Помимо консервативного ядра из пяти субъединиц, загрузчик зажимов E. coli содержит две дополнительные субъединицы, субъединицы ψ и χ, и эти дополнительные субъединицы также обнаруживаются в других загрузчиках зажимов бактерий [46,47].Субъединицы ψ и χ образуют комплекс 1: 1, который связывает зажим-загрузчик посредством взаимодействий между ψ и DnaX [48,49] и стабилизирует комплекс зажим-загрузчик [50]. Субъединица χ также взаимодействует с одноцепочечным ДНК-связывающим белком (SSB). Это взаимодействие χ-SSB облегчает перемещение примазы для передачи праймера РНК ДНК-полимеразе [51], увеличивает эффективность загрузки зажима [52] и стабилизирует взаимодействие холофермента с матрицей, покрытой SSB [52]. , 53]. Хотя комплекс из пяти субъединиц способен нагружать зажимы, эффективность нагрузки зажима этого минимального зажима-загрузчика (DnaX 3 δδ ′) не так высока, как у полного комплекса из семи субъединиц (DnaX 3 δδ′ψχ ) [46,49,53,54].Субъединица ψ может увеличивать активность зажимного загрузчика либо за счет содействия АТФ-индуцированным конформационным изменениям, либо за счет стабилизации конформационного состояния, связанного с АТФ, которое придает фиксирующему загрузчику высокое сродство к ДНК [54].
В E. coli экспрессируются две разные формы белка DnaX: длинная форма τ и короткая форма γ. Это верно для некоторых, но не для всех бактерий (см. Обзор [47]). Субъединица τ представляет собой полноразмерный продукт гена dnaX , а субъединица γ является результатом сдвига рамки трансляции, который преждевременно усекает белок, так что γ составляет примерно 2/3 длины τ и имеет идентичную последовательность, за исключением последнего. аминокислота.Субъединица γ содержит три домена и может быть собрана в полностью активный комплекс зажима-загрузчика [55], называемый комплексом γ (γ 3 δδ′ψχ), однако бактерии, экспрессирующие только γ, нежизнеспособны, тогда как бактерии, экспрессирующие τ растут нормально [56]. С-концевое удлинение на τ необходимо для опосредования белок-белковых взаимодействий и координации активности в репликационной вилке. Субъединица τ связывается с ДНК-полимеразой III через домен V [57], физически привязывая полимеразу к зажиму-загрузчику, образуя холофермент ДНК-полимеразы.Форма холофермента, выделенного из клеток, содержит две копии ДНК-полимеразы III и зажим-загрузчик композиции τ 2 γδδ′ψχ [58]. Этот холофермент димерной полимеразы способен сочетать репликацию ведущей и отстающей нити ДНК [59]. Недавно было показано, что тримерный холофермент ДНК-полимеразы III, состоящий из трех копий ДНК-полимеразы III и фиксатора, содержащего только τ (τ 3 δδ ‘ψχ), полностью активен в анализах восстановленной репликации [60]. Это поднимает интригующую возможность того, что тримерный холофермент ДНК-полимеразы может функционировать в репликации ДНК, так что третья ДНК-полимераза может вступать во владение, когда ведущая или отстающая полимераза цепи встречает блокировку синтеза ДНК.Помимо связывания полимеразы с загрузчиком зажима, субъединица τ опосредует другие ключевые белковые взаимодействия в репликационной вилке. Субъединица τ взаимодействует с геликазой DnaB, чтобы связать раскручивание дуплекса на вилке репликации с синтезом ДНК [61]. Субъединица τ предотвращает удаление β-зажима, пока ДНК-полимераза активно синтезирует ДНК [62], но затем опосредует диссоциацию и рециклинг ДНК-полимеразы при завершении синтеза фрагмента Окадзаки [63].
Эукариотический зажим-загрузчик, RFC, представляет собой гетеропентамер, содержащий четыре маленькие субъединицы (B — E) размером 36-40 кДа и одну большую субъединицу (A), 95 кДа в S.cerevisiae и 140 кДа у человека. Большая субъединица, RFC-A, содержит большое N-концевое расширение и меньшее C-концевое расширение, которые отсутствуют у других субъединиц. Клеточные функции этих двух расширений пока не известны. N-концевой участок гомологичен бактериальным ДНК-лигазам и поли (АДФ-рибозе) полимеразе и консервативен у эукариот [64–66]. N-концевая область связывает ДНК [65,67], но не требуется непосредственно для загрузки зажимов или жизнеспособности дрожжей [68–70]. Делеция N-концевой области фактически увеличивает нагрузочную активность зажима in vitro [70].Нет никаких доказательств того, что RFC напрямую связывается с ДНК-полимеразами ε или δ с образованием холоферментного комплекса ДНК-полимераза-зажим-загрузчик, который обнаруживается у бактерий.
3. A-субъединица RFC и альтернативных загрузчиков зажимов
Существуют три альтернативных комплекса RFC, в которых RFC-A заменен другим белком [71–83]. В одном из таких комплексов Rad24 в S. cerevisiae [76] или Rad17 у людей и S. pombe [77] заменен на RFC-A, чтобы сформировать загрузчик зажима, необходимый для ответа контрольной точки во время S-фазы. (рассмотрено в [84,85]).Биохимия и клеточные функции этого альтернативного загрузчика зажимов, пожалуй, лучше всего изучены из трех. Замена Rad24 / Rad17 на RFC-A изменяет специфичность подложки загрузчика зажимов. Этот загрузчик зажима контрольной точки взаимодействует и загружает альтернативный зажим, называемый комплексом 9-1-1 (состоящий из Rad9, Hus1 и Rad1 у людей и S. pombe , и Ddc1, Mec3 и Rad17, соответственно, в S). .cerevisiae ) на ДНК [77,86,87]. Хотя комплекс Rad24 / Rad17-RFC может связывать PCNA, он неспособен продуктивно загружать PCNA в ДНК [86,88].Однако Rad24-RFC может выгружать PCNA из ДНК [88]. Замена RFC-A на Rad24 / Rad17 также изменяет специфичность ДНК-субстрата, так что фиксирующий загрузчик контрольной точки больше не обладает специфичностью для ss / ds-соединений ДНК с 3′-загнутыми концами, которые имеет RFC, и связывает любые соединения ss / ds-ДНК [ 87,89,90]. Покрытие ss-ДНК с помощью RPA дает загрузчику с зажимом контрольной точки предпочтение для ss / ds-соединений ДНК с 5′-загнутыми концами [90,91]. Эти биохимические свойства согласуются с клеточной функцией зажимного загрузчика checkpoint (недавно рассмотрено в [92–95]).Комплекс Rad24 / Rad17-RFC загружает комплекс 9-1-1 в сайты повреждения ДНК и остановленные репликационные вилки, чтобы опосредовать ответ контрольной точки путем активации киназы ATR [96–98].
Замена RFC-A на Ctf18 формирует альтернативный комплекс RFC (Ctf18-RFC), который необходим для сцепления сестринских хроматид [78–80]. Ctf18 связывает Ddc1 и Ctf8 и рекрутирует эти белки в комплекс с образованием комплекса RFC из семи субъединиц. Ctf18-RFC из пяти и семи субъединиц может загружать PCNA в ДНК и выгружать PCNA из ДНК [99–101].
Третий альтернативный комплекс RFC содержит Elg1, вносит вклад в стабильность хромосом и подавляет хромосомные перестройки [81–83] (rev. [102,103]). Взаимодействие между Elg1 и PCNA было продемонстрировано совместной иммунопреципитацией Elg1 и PCNA из экстрактов дрожжевых клеток [81], но продуктивное взаимодействие Elg1-RFC • PCNA не было продемонстрировано в биохимических анализах in vitro . Пока неясно, является ли клеточная мишень Elg1-RFC PCNA или альтернативный зажим еще не идентифицирован.
4. Зажим и связывание ДНК
Структурные [33,34,104,105] и биохимические исследования [88,106–109] подтверждают модель, в которой загрузчик зажима связывает зажим через контакты между N-концевым доменом (I) каждого зажима. блок загрузчика и одна грань зажима (). Гидрофобные остатки в консервативном мотиве последовательности в A-субъединице связывают гидрофобный карман на зажиме [33,34]. Гидрофобный карман расположен вблизи границы раздела соседних доменов внутри зажимного мономера. В PCNA есть три таких кармана и RFC • Структура PCNA () показывает, что C-субъединица устанавливает аналогичные контакты, но в меньшей степени, с соседним мономером PCNA [33].B-субъединица в структуре RFC • PCNA контактирует с PCNA вблизи границы раздела двух доменов между соседними мономерами. В этой конструкции зажим не открывается, и вполне вероятно, что продуктивное формирование комплекса загрузчик открытого зажима • зажим требует, чтобы каждый из пяти подузлов загрузчика зажима имел аналогичные контакты с зажимом. Учитывая шестидоменную структуру зажима, субъединицы загрузки зажима могут связывать зажим в пяти из шести междоменных областей, а шестой может свободно открываться ().
Зажим и связывание ДНКA) Ленточная диаграмма S.cerevisiae RFC • Показан комплекс PCNA. N-концевые домены (I) субъединиц A, B и C контактируют с одной стороной зажима. Контакты с зажимом являются наибольшими для субъединицы A и уменьшаются вокруг кольца до точки, в которой субъединицы D и E вообще не контактируют с зажимом. В этой конструкции зажим закрыт. Предполагается, что в комплексе загрузчика с зажимом и зажимом голубая и пурпурная субъединицы PCNA поднимутся вверх, так что N-концевой домен (I) каждой субъединицы контактирует с поверхностью кольца, как показано на рисунке на панели C.Аргининовые пальцы в консервативном мотиве Ser-Arg-Cys были мутированы на глутамин, и ATPγS был заменен на АТФ для предотвращения гидролиза АТФ. Большая субъединица A была усечена до остатков 295 — 785 (из 861) и по размеру ближе к малым субъединицам RFC в этой структуре. Эта диаграмма была создана из файла PDB 1SXJ [33] с использованием PyMol от DeLano Scientific LLC. B) Показана гипотетическая модель, которая иллюстрирует след, который оставляет загрузчик зажима при связывании зажима с образованием открытого зажимного комплекса: загрузчик • зажим.Черные кружки представляют контакты с лицевой стороной PCNA, осуществляемые каждой субъединицей RFC (A — E). C) На мультипликационных диаграммах RFC и PCNA каждый субъединиец окрашен, как на ленточных диаграммах. Отдельные домены каждой субъединицы представлены сферами или овалами. Диаграммы мультипликации основаны на структурных и биохимических данных, обсуждаемых в тексте. В общем, реакцию нагрузки зажима можно разделить на две фазы в зависимости от требований АТФ. На первом этапе формированию комплекса «тройной зажим-загрузчик • зажим • ДНК» способствует связывание АТФ.А во второй фазе связывание ДНК запускает гидролиз АТФ и освобождение зажима ДНК.
Субъединицы в загрузчике зажима принимают спиральную конформацию относительно оси, проходящей через центр кольца [33,105], и это, вероятно, открывает зажим в конформации вне плоскости [105,110]. Считается, что дуплексная часть загрунтованного шаблона входит в комплекс зажима-загрузчика • зажима через большое отверстие, имеющееся на N-концевой стороне загрузочного зажима, и простирается вверх к воротнику (см.).Моделирование примированной матричной ДНК в структуре RFC • PCNA показывает, что загрузчик зажима может связывать ДНК способом, подобным «завинчивающейся крышке» с субъединицами RFC, и зажимает спираль вокруг дуплекса с тем же шагом, что и спираль [33,105]. Эта модель также объясняет, как загрузчики зажимов специфически распознают соединения ss / ds ДНК праймированных матриц. Примерно один спиральный виток дуплексной части праймированной матрицы помещается в RFC, так что конец 3′-праймера простирается до воротника, образованного C-концевыми доменами субъединиц RFC [33,111].Это затем поместит 5′-одноцепочечный выступ в положение для выхода через разрыв между A- и E-субъединицами. Учитывая эту модель, интересно предположить, как замена Rad24 / Rad17 на RFC-A изменяет специфичность ДНК-субстрата загрузчика зажима контрольной точки.
5. Связывание и гидролиз АТФ
Зажимным загрузчикам требуется АТФ для загрузки зажимов. В конечном итоге связывание и гидролиз АТФ способствует конформационным изменениям в загрузчике зажима, которые модулируют его сродство к зажиму и ДНК.Общей чертой членов семейства AAA + ATPase, включая зажимные загрузчики, является расположение множественных субъединиц связывания ATP внутри кольца, так что сайты связывания ATP расположены на стыке соседних субъединиц (обзор в [39–43]). Хотя пять основных субъединиц зажима-загрузчика имеют общую гомологию с белками AAA +, только подмножество, четыре (A — D) в RFC [66], четыре в зажимном загрузчике бактериофага T4 gp44 / 62 и три (B — D) в Зажим-загрузчик E. coli [112,113], являются функциональными АТФазами.Сайты связывания АТФ расположены на границе доменов I и II внутри субъединицы (), и каждый содержит консервативные мотивы последовательностей Walker A и Walker B [33,66]. Консервативные пальцы Arg отходят от одной субъединицы, чтобы взаимодействовать с АТФ, связанным с соседней субъединицей [33,44,45]. Такое расположение сайтов АТФ делает возможным динамическое соединение связывания АТФ и гидролиза, чтобы способствовать конформационным изменениям в комплексе, который регулирует связывание зажима и ДНК.
Хотя загрузчики зажимов демонстрируют большое сходство в архитектуре и расположении сайтов АТФ, по-видимому, существуют некоторые различия в механизмах, с помощью которых загрузчики зажимов используют связывание и гидролиз АТФ, чтобы способствовать загрузке зажимов.В общем, связывание АТФ способствует конформационным изменениям, которые придают загрузчику зажима высокое сродство к зажиму и ДНК [106,114–117], а гидролиз АТФ имеет противоположный эффект, снижая сродство загрузчика зажима к зажиму и ДНК (). Но есть вариации на эту тему с различиями в том, как заполняются сайты АТФ, и в какой момент реакции нагрузки зажима АТФ гидролизуется.
Слабо гидролизуемый аналог АТФ, АТФγS, был использован для идентификации стадий в реакциях загрузки зажима, которые требуют связывания АТФ, но не гидролиза.Исследования связывания с RFC показывают, что сайты АТФ заполняются последовательно, так что связывание двух молекул ATPγS способствует связыванию либо PCNA, либо ДНК, а связывание PCNA или ДНК способствует связыванию третьей молекулы ATPγS и образованию тройного RFC • PCNA • ДНК комплекс способствует связыванию четвертой молекулы ATPγS [118]. Напротив, все три сайта в комплексе E. coli γ (γ 3 δδ ‘ψχ) связывают АТФ в отсутствие зажима или ДНК [119]. Точно так же загрузчик зажима бактериофага Т4 связывает четыре молекулы АТФ до связывания зажима или ДНК.Связывание АТФ способствует связыванию и раскрытию зажимов как комплексом E. coli γ, так и RFC [88,116,117,120,121], а также образованию комплексов тройной зажим-загрузчик • зажим • ДНК [122,123]. Ситуация может быть иной для загрузчика зажимов бактериофага T4 gp44 / 64 в том смысле, что связывание четырех молекул АТФ необходимо для связывания зажима gp45, но для открытия зажима может потребоваться гидролиз двух из четырех молекул АТФ [124,125]. Однако другие исследования показывают, что gp44 / 62 не нуждается в гидролизе АТФ для образования комплекса open clip loader • clip [126,127].
Гидролиз АТФ необходим для изолированных загрузчиков зажимов для высвобождения зажимов на ДНК [122–124,128,129]. Связывание ДНК с зажимом-загрузчиком • зажимные комплексы запускают гидролиз АТФ, и это, в свою очередь, заставляет зажим-загрузчик отпускать зажим на ДНК. Механизм, с помощью которого загрузчики зажимов распознают соответствующие сайты для нагрузки зажимов, то есть ss / ds-соединения ДНК с 3′-загнутыми концами, является динамичным в том смысле, что эти сайты предпочтительно запускают гидролиз АТФ и освобождение зажима [130,131]. Интригующее исследование с использованием E.coli Холофермент ДНК-полимеразы III ((ДНК-полимераза III) 2 τ 2 γδδ ′ ψχ) показал, что загрузчик зажима может продуктивно загружать зажим на ведущую цепь в отсутствие гидролиза АТФ с использованием АТФγS, но требует гидролиза АТФ. для установки второго зажима на отстающую прядь [132,133]. Возможно, что белок-белковые взаимодействия внутри холофермента придают эту асимметрию потребности в гидролизе АТФ загрузчиком зажима.
Загрузчики зажимов точно настроены в своем ответе на АТФ, и γ-фосфорильная группа АТФ, вероятно, будет ключевой особенностью, с помощью которой загрузчик зажимов воспринимает и реагирует на изменения нуклеотидов, чтобы различать АТФ и гидролизованный АДФ + P и .Консервативные пальцы Arg в загрузчиках зажимов простираются от одной субъединицы к γ-фосфорильной группе АТФ, связанной с соседней субъединицей. Одной из функций, которую могут выполнять эти Arg-пальцы, является помощь в катализе реакции гидролиза путем стабилизации заряда, который образуется на γ-фосфате в переходном состоянии, как это видно для белков, активирующих GTPase [134]. Хотя пальцы Arg могут играть роль в гидролизе АТФ загрузчиками зажимов, их трудно разрезать, потому что пальцы Arg также играют роль в зажиме и связывании ДНК, которое происходит до гидролиза.Мутация Arg-пальцев в Ala как в комплексе E. coli γ (γ 3 δδ ‘ψχ), так и в RFC не влияет на связывание АТФ с загрузчиками зажимов [119,120]. Однако в комплексе E. coli γ мутации Arg в Ala снижают активность связывания ДНК и связывания зажима [135]. Интересно, что мутация Arg-пальцев в RFC снижает активность связывания ДНК, но не влияет на связывание PCNA, как оценивается с помощью анализа открытия зажима [120]. В обеих системах мутация пальцев Arg в некоторых субъединицах оказывает большее влияние на связывание ДНК, чем мутации в других сайтах, что предполагает, что связывание АТФ в некоторых сайтах может быть более важным для регуляции связывания ДНК.Эти исследования предполагают, что консервативные пальцы Arg могут играть роль в восприятии связанного АТФ или в ответе на связывание АТФ конформационными изменениями, которые перемещают пальцы Arg достаточно близко, чтобы взаимодействовать с γ-фосфорильной группой АТФ. В качестве технического примечания, учитывая потенциальную важность γ-фосфорильной группы в стимулировании конформационных изменений, механистические исследования, в которых используется ATPγS, следует интерпретировать с осторожностью. Несмотря на то, что загрузчики зажимов могут связывать АТФ и АТФγS со сходной аффинностью [45,115,116,118], АТФγS может не обладать эффективностью АТФ в стимулировании конформационных изменений.Сродство комплекса E. coli γ (γ 3 δδ ‘ψχ) к β-зажиму, по крайней мере, на порядок слабее в анализах с ATPγS, чем с ATP, и связывание минимального комплекса из пяти субъединиц ( γ 3 δδ ‘) к β-зажиму не сильно стимулируется, если вообще не стимулируется добавлением ATPγS [54]. Связывание ДНК также зависит от замены АТФ на АТФγS, так что скорость связывания γ-комплекса с ДНК медленнее в анализах с АТФγS, чем с АТФ [130].
6. Заключительные замечания
До сих пор был представлен довольно статичный вид нагрузки зажима, но для успешного нагружения зажимов должны произойти многие изменения во взаимодействиях между загрузчиком зажима и зажимом, а также между загрузчиком зажима и ДНК.Вероятно, что взаимодействия, которые выполняет загрузчик зажима со своими партнерами по связыванию, являются динамическими в том смысле, что каждое событие связывания (или гидролиза) способствует конформационным изменениям в загрузчике зажима, которые облегчают следующий этап реакции. На самом базовом уровне загрузчик зажима должен изначально иметь высокое сродство к зажиму и ДНК, чтобы соединить эти макромолекулы, но затем должен иметь низкое сродство, чтобы освободить зажим на ДНК для использования ДНК-полимеразой. Эта модуляция аффинности частично достигается за счет связывания и гидролиза АТФ.В конформационном состоянии, связанном с АТФ, загрузчик зажима имеет высокое сродство к зажиму и ДНК, а при гидролизе АТФ сродство снижается, и загрузчик зажима освобождает зажим на ДНК (). Однако только связывание и гидролиз АТФ не может обеспечить достаточный механизм для упорядоченной модуляции аффинности, который поддерживает эффективную реакцию загрузки зажима. И эта реакция должна быть эффективной, чтобы поддерживать загрузку зажима на отстающей цепи, особенно в E. coli , где зажим должен быть загружен для каждого синтезируемого фрагмента Окадзаки размером 1-2 т.п.н., и эти фрагменты синтезируются каждые 1-2 секунды.Вероятно, существует дополнительный уровень регуляции связывания и гидролиза АТФ. Например, рассмотрим механизм, в котором загрузчик зажимов должен был просто связывать и гидролизовать АТФ самостоятельно. В этом случае зажим и ДНК могут связываться или не связываться до гидролиза АТФ, и будут возникать бесполезные циклы связывания и гидролиза АТФ. Это снизило бы эффективность реакции нагрузки зажима. В идеале система должна быть настроена так, чтобы гидролиз АТФ происходил только после , когда загрузчик зажима связывает и зажим, и ДНК.Точно так же определенный временной порядок связывания и освобождения зажима и ДНК повысит эффективность реакции нагрузки зажима. Например, если загрузчик зажима освободит захват ДНК до закрытия зажима, ДНК может выскользнуть из открытого зажима. Мы предполагаем, что дополнительные уровни временной регуляции в реакции загрузки зажима могут происходить из трех источников: 1) отдельные субъединицы загрузчика зажима в значительной степени ответственны за регулирование различных взаимодействий, 2) связывание и гидролиз АТФ происходит последовательно в отдельных сайтах и 3) взаимодействия с зажим и ДНК способствуют изменениям в загрузчике зажима.Это регулирование может способствовать определенному временному порядку событий, который приводит к эффективному нагружению зажима. Это не означает, что альтернативных путей не существует, но что система склоняется в пользу одного пути. Точно так же упорядоченное связывание / гидролиз АТФ и связывание / высвобождение зажима и ДНК не обязательно являются процессами по принципу «все или ничего» (например, загрузчик зажима должен связываться один перед другим), но может иметь место кинетическое предпочтение для одного события для происходят раньше других. Необходимы дальнейшие механистические исследования, чтобы ответить на эти вопросы и раскрыть подробный механизм и временной порядок событий в реакции нагрузки зажима.
Благодарности
Я благодарю Анкиту Чиранию и Дженнифер А. Томпсон за критическое чтение и вдумчивые комментарии к этой рукописи. Исследования механизмов нагружения зажимов в лаборатории Блума поддерживаются грантами GM055996 и GM082849 Национальных институтов здравоохранения.
Сноски
Заявление издателя: Это PDF-файл неотредактированной рукописи, принятой к публикации. В качестве услуги для наших клиентов мы предоставляем эту раннюю версию рукописи.Рукопись будет подвергнута копирайтингу, верстке и рассмотрению полученного доказательства, прежде чем она будет опубликована в окончательной форме для цитирования. Обратите внимание, что во время производственного процесса могут быть обнаружены ошибки, которые могут повлиять на содержание, и все юридические оговорки, относящиеся к журналу, имеют отношение.
Ссылки
1. Kong XP, Onrust R, O’Donnell M, Kuriyan J. Трехмерная структура субъединицы β холофермента ДНК-полимеразы III E. coli : скользящий зажим для ДНК.Клетка. 1992; 69: 425–437. [PubMed] [Google Scholar] 2. Стукенберг П.Т., Стадвелл-Воган П.С., О’Доннелл М. Механизм скользящего β-зажима голофермента ДНК-полимеразы III. J Biol Chem. 1991; 266: 11328–11334. [PubMed] [Google Scholar] 3. Гурвиц Дж., Викнер С. Участие двух белковых факторов и АТФ в синтезе ДНК in vitro , катализируемом ДНК-полимеразой 3 из Escherichia coli . Proc Natl Acad Sci (США) 1974; 71: 6–10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 4. Страницы V, Фукс Р.П.Как повреждения ДНК превращаются в мутации внутри клеток? Онкоген. 2002; 21: 8957–8966. [PubMed] [Google Scholar] 5. Индиани С., МакИнерни П., Джорджеску Р., Гудман М. Ф., О’Доннелл М. Инструментальный ремень со скользящим зажимом связывает ДНК-полимеразы с высокой и низкой точностью одновременно. Mol Cell. 2005; 19: 805–815. [PubMed] [Google Scholar] 6. Мага Г., Хабшер У. Ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA): танцор со многими партнерами. J Cell Sci. 2003; 116: 3051–3060. [PubMed] [Google Scholar] 7. Вивона Дж. Б., Кельман З. Разнообразный спектр белков, взаимодействующих со скользящим зажимом.FEBS Lett. 2003. 546: 167–172. [PubMed] [Google Scholar] 8. Гэри Р., Ким К., Корнелиус Х.Л., Парк М.С., Мацумото Ю. Ядерный антиген пролиферирующих клеток облегчает удаление при репарации эксцизией основания с длинным участком. J Biol Chem. 1999; 274: 4354–4363. [PubMed] [Google Scholar] 9. Ли Х, Ли Дж, Харрингтон Дж, Либер М.Р., Бургерс П.М. Синтез запаздывающей нити ДНК в репликационной вилке эукариот включает связывание и стимуляцию FEN-1 ядерным антигеном пролиферирующих клеток. J Biol Chem. 1995; 270: 22109–22112. [PubMed] [Google Scholar] 10.Том С., Хенриксен Л.А., Бамбара Р.А. Механизм, посредством которого ядерный антиген пролиферирующих клеток стимулирует эндонуклеазу лоскута 1. J Biol Chem. 2000; 275: 10498–10505. [PubMed] [Google Scholar] 11. Левин Д.С., Бай В., Яо Н., О’Доннелл М., Томкинсон А.Е. Взаимодействие между ДНК-лигазой I и ядерным антигеном пролиферирующих клеток: значение для синтеза и соединения фрагментов Окадзаки. Proc Natl Acad Sci (США) 1997; 94: 12863–12868. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12. Левин Д.С., МакКенна А.Е., Мотицка Т.А., Мацумото Ю., Томкинсон А.Взаимодействие между PCNA и ДНК-лигазой I является критическим для соединения фрагментов Окадзаки и репарации с вырезанием основания с длинным участком. Curr Biol. 2000; 10: 919–922. [PubMed] [Google Scholar] 13. Том С., Хенриксен Л.А., Парк М.С., Бамбара РА. ДНК-лигаза I и ядерный антиген пролиферирующих клеток образуют функциональный комплекс. J Biol Chem. 2001; 276: 24817–24825. [PubMed] [Google Scholar] 14. Кларк А.Б., Валле Ф., Дрочманн К., Гэри Р.К., Кункель Т.А. Функциональное взаимодействие ядерного антигена пролиферирующих клеток с комплексами MSh3-MSH6 и MSh3-MSh4.J Biol Chem. 2000; 275: 36498–36501. [PubMed] [Google Scholar] 15. Флорес-Розас Х, Кларк Д., Колоднер РД. Ядерный антиген пролиферирующих клеток и Msh3p-Msh6p взаимодействуют с образованием активного комплекса распознавания неправильной пары. Генетика природы. 2000. 26: 375–378. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kleczkowska HE, Marra G, Lettieri T, Jiricny J. hMSh4 и hMSH6 взаимодействуют с PCNA и колокализуются с ним в фокусах репликации. Genes Dev. 2001; 15: 724–736. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Лопес де Саро Ф.Дж., О’Доннелл М.Взаимодействие скользящего зажима бета с MutS, лигазой и ДНК-полимеразой I. Proc Natl Acad Sci (США) 2001; 98: 8376–8380. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Симмонс Л.А., Дэвис Б.В., Гроссман А.Д., Уокер Г.К. Бета-зажим направляет локализацию исправления несоответствия в Bacillus subtilis. Mol Cell. 2008; 29: 291–301. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Умар А., Бюермейер А.Б., Саймон Дж. А., Томас, округ Колумбия, Кларк А.Б., Лискей Р.М., Кункель Т.А. Потребность в PCNA в репарации ошибочного спаривания ДНК на этапе, предшествующем ресинтезу ДНК.Клетка. 1996. 87: 65–73. [PubMed] [Google Scholar] 20. Dou H, Theriot CA, Das A, Hegde ML, Matsumoto Y, Boldogh I, Hazra TK, Bhakat KK, Mitra S. Взаимодействие ДНК-гликозилазы NEIL1 человека с ядерным антигеном пролиферирующих клеток. Возможность связанной с репликацией репарации окисленных оснований в геномах млекопитающих. J Biol Chem. 2008. 283: 3130–3140. [PubMed] [Google Scholar] 21. Ко Р., Беннет С.Е. Физическое и функциональное взаимодействие ядерной урацил-ДНК-гликозилазы человека с ядерным антигеном пролиферирующих клеток.Ремонт ДНК (Amst) 2005; 4: 1421–1431. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Krokan HE, Otterlei M, Nilsen H, Kavli B, Skorpen F, Andersen S, Skjelbred C, Akbari M, Aas PA, Slupphaug G. Свойства и функции урацил-ДНК-гликозилазы человека из гена UNG. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol. 2001. 68: 365–386. [PubMed] [Google Scholar] 23. Паркер А., Гу И, Махони В., Ли С.Х., Сингх К.К., Лу А.Л. Человеческий гомолог белка репарации MutY (hMYH) физически взаимодействует с белками, участвующими в эксцизионной репарации длинных участков ДНК.J Biol Chem. 2001; 276: 5547–5555. [PubMed] [Google Scholar] 24. Чуанг Л.С., Ян Х.И., Ко ТВ, Нг ХХ, Сюй Джи, Ли Б.Ф. Комплекс ДНК человека- (цитозин-5) метилтрансфераза-PCNA как мишень для p21WAF1. Science (New York, NY. 1997; 277: 1996–2000. [PubMed] [Google Scholar]] 25. Шибахара К., Стиллман Б. Репликационно-зависимое маркирование ДНК с помощью PCNA способствует наследованию хроматина, сопряженному с CAF-1. Cell. 1999; 96: 575–585. [PubMed] [Google Scholar] 26. Gulbis JM, Kelman Z, Hurwitz J, O’Donnell M, Kuriyan J. Структура C-концевой области p21 WAF1 / CIP1 в комплексе с человеческий PCNA.Клетка. 1996. 87: 297–306. [PubMed] [Google Scholar] 27. Кришна Т.С., Конг XP, Гэри С., Бургерс П.М., Куриян Дж. Кристаллическая структура фактора процессивности эукариотической ДНК-полимеразы PCNA. Клетка. 1994; 79: 1233–1243. [PubMed] [Google Scholar] 28. Моарефи И., Джерузалми Д., Тернер Дж., О’Доннелл М., Куриян Дж. Кристаллическая структура фактора процессивности ДНК-полимеразы бактериофага Т4. J Mol Biol. 2000; 296: 1215–1223. [PubMed] [Google Scholar] 29. Shamoo Y, Steitz TA. Построение реплисомы из взаимодействующих частей: скользящий зажим в комплексе с пептидом из ДНК-полимеразы и комплексом редактирования полимеразы.Клетка. 1999. 99: 155–166. [PubMed] [Google Scholar] 30. Мацумиа С., Ишино Ю., Морикава К. Кристаллическая структура скользящего зажима архейной ДНК: ядерный антиген пролиферирующих клеток из Pyrococcus furiosus . Protein Sci. 2001; 10: 17–23. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 31. Уильямс Г.Дж., Джонсон К., Рудольф Дж., МакМахон С.А., Картер Л., Оке М., Лю Х., Тейлор Г.Л., Уайт М.Ф., Нейсмит Дж. Х. Структура гетеротримерной PCNA из Sulfolobus solfataricus . Acta crystallographica. 2006; 62: 944–948.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32. Argiriadi MA, Goedken ER, Bruck I, O’Donnell M, Kuriyan J. Кристаллическая структура скользящего зажима ДНК-полимеразы из грамположительной бактерии. BMC Struct Biol. 2006; 6: 2. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 33. Боуман Г.Д., О’Доннелл М., Куриян Дж. Структурный анализ эукариотического скользящего комплекса загрузочного зажима-зажима ДНК. Природа. 2004. 429: 724–730. [PubMed] [Google Scholar] 34. Джерузалми Д., Юрьева О., Чжао Ю., Янг М., Стюарт Дж., Хингорани М., О’Доннелл М., Куриян Дж.Механизм процессивного открывания зажима ключом дельта-субъединицы комплекса зажима-загрузчика E. coli ДНК-полимеразы III. Клетка. 2001; 106: 417–428. [PubMed] [Google Scholar] 35. Dalrymple BP, Kongsuwan K, Wijffels G, Dixon NE, Jennings PA. Универсальный мотив межбелкового взаимодействия в системах репликации и репарации ДНК эубактерий. Proc Natl Acad Sci (США), 2001; 98: 11627–11632. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 36. Лопес Де Саро Ф.Дж., Джорджеску Р.Э., Гудман М.Ф., О’Доннелл М.Конкурентное использование зажима процессивности ДНК-полимеразами во время репликации и репарации ДНК. EMBO J. 2003; 22: 6408–6418. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37. Варбрик Е. Связывание PCNA через консервативный мотив. BioEssays. 1998. 20: 195–199. [PubMed] [Google Scholar] 38. Уорбрик Э. Загадка многих партнеров PCNA. BioEssays. 2000; 22: 997–1006. [PubMed] [Google Scholar] 39. Нойвальд AF, Aravind L, Spouge JL, Koonin EV. AAA +: класс шапероноподобных АТФаз, связанных со сборкой, работой и разборкой белковых комплексов.Genome Res. 1999; 9: 27–43. [PubMed] [Google Scholar] 40. Огура Т., Уилкинсон А.Дж. АТФазы суперсемейства AAA +: общая структура — разнообразная функция. Гены Клетки. 2001; 6: 575–597. [PubMed] [Google Scholar] 41. Айер Л.М., Лейпе Д.Д., Кунин Е.В., Аравинд Л. История эволюции и классификация ААА + АТФаз более высокого порядка. J. Struct Biol. 2004. 146: 11–31. [PubMed] [Google Scholar] 42. Хэнсон П.И., Уайтхарт СВ. Белки AAA +: есть двигатель, будет работать. Nat Rev Mol Cell Biol. 2005; 6: 519–529. [PubMed] [Google Scholar] 43.Эрцбергер Дж. П., Бергер Дж. М.. Эволюционные взаимоотношения и структурные механизмы белков AAA +. Annu Rev Biophys Biomol Struct. 2006; 35: 93–114. [PubMed] [Google Scholar] 44. Джерузалми Д., О’Доннелл М., Куриян Дж. Кристаллическая структура гамма (γ) комплекса загрузчика процессивного зажима ДНК-полимеразы III E. coli . Клетка. 2001; 106: 429–441. [PubMed] [Google Scholar] 45. Казмирски С.Л., Подобник М., Вейтце Т.Ф., О’Доннелл М., Курьян Дж. Структурный анализ неактивного состояния комплекса зажим-загрузчик ДНК-полимеразы Escherichia coli .Proc Natl Acad Sci (США) 2004; 101: 16750–16755. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 46. Джарвис Т.К., Бодри А.А., Буллард Дж. М., Окснер У., Даллманн Х. Г., МакГенри К. С.. Открытие и характеристика скрытой пси-субъединицы псевдомонадной ДНК-репликазы. J Biol Chem. 2005; 280: 40465–40473. [PubMed] [Google Scholar] 47. Wijffels G, Dalrymple B, Kongsuwan K, Dixon NE. Сохранение репликаз эубактерий. МСБМБ Жизнь. 2005; 57: 413–419. [PubMed] [Google Scholar] 48. Гловер Б.П., МакГенри К.С. DnaX-связывающие субъединицы δ ‘и ψ связаны с γ, а не τ в холоферменте ДНК-полимеразы III.J Biol Chem. 2000; 275: 3017–3020. [PubMed] [Google Scholar] 49. Сяо Х., Донг З., О’Доннелл М. Вспомогательные белки ДНК-полимеразы III. IV. Характеристика ци и пси. J Biol Chem. 1993; 268: 11779–11784. [PubMed] [Google Scholar] 50. Олсон М.В., Даллманн Х.Г., МакГенри К.С. DnaX голофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli . Комплекс χψ функционирует за счет увеличения сродства τ и γ к δ • δ ‘до физиологически значимого диапазона. J Biol Chem. 1995; 270: 29570–29577. [PubMed] [Google Scholar] 51.Южаков А., Кельман З., О’Доннелл М. Обмен местами в ДНК — трехточечный переключатель лежит в основе передачи праймера от праймы к репликативной ДНК-полимеразе. Клетка. 1999; 96: 153–163. [PubMed] [Google Scholar] 52. Кельман З., Южаков А., Анджелкович Дж., О’Доннелл М. Посвященный отстающей цепи — субъединице ДНК-полимеразы III, холофермент контактирует с SSB, чтобы способствовать процессуальному удлинению и сборке скользящего зажима. EMBO J. 1998; 17: 2436–2449. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 53. Гловер Б.П., МакГенри К.С.Субъединицы chi psi холофермента ДНК-полимеразы III связываются с одноцепочечным ДНК-связывающим белком (SSB) и способствуют репликации матрицы, покрытой SSB. J Biol Chem. 1998; 273: 23476–23484. [PubMed] [Google Scholar] 54. Андерсон С.Г., Уильямс С.Р., О’Доннелл М., Блум Л.Б. Функция субъединицы psi при загрузке скользящего зажима ДНК-полимеразы Escherichia coli . J Biol Chem. 2007. 282: 7035–7045. [PubMed] [Google Scholar] 55. Онраст Р., Финкельштейн Дж., Нактинис В., Тернер Дж., Фанг Л., О’Доннелл М.Сборка машины для репликации хромосом: две ДНК-полимеразы, загрузочный зажим и скользящие зажимы в одной холоферментной частице. I. Организация захвата погрузчика. J Biol Chem. 1995; 270: 13348–13357. [PubMed] [Google Scholar] 56. Блинкова А., Хервас С., Стукенберг П.Т., Онраст Р., О’Доннелл М., Уокер-младший. Холофермент ДНК-полимеразы III Escherichia coli содержит оба продукта гена dnaX, тау и гамма, но только тау важен. J Bacteriol. 1993; 175: 6018–6027. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 57.Гао Д., МакГенри К.С. тау связывает и организует репликацию Escherichia coli через отдельные домены. Частичный протеолиз тау-белка с концевой меткой для определения доменов-кандидатов и назначения домена V в качестве альфа-связывающего домена. J Biol Chem. 2001; 276: 4433–4440. [PubMed] [Google Scholar] 58. Маки Х., Маки С., Корнберг А. Холофермент ДНК-полимеразы III Escherichia coli . IV. Холофермент представляет собой асимметричный димер с двойными активными центрами. J Biol Chem. 1988; 263: 6570–6578. [PubMed] [Google Scholar] 59.Wu CA, Zechner EL, Hughes AJ, Jr, Franden MA, McHenry CS, Marians KJ. Скоординированный синтез ведущей и отстающей цепи в репликационной вилке ДНК Escherichia coli . IV. Восстановление асимметричного димерного голофермента ДНК-полимеразы III. J Biol Chem. 1992; 267: 4064-4073. [PubMed] [Google Scholar] 60. МакИнерни П., Джонсон А., Кац Ф., О’Доннелл М. Характеристика реплисомы тройной ДНК-полимеразы. Mol Cell. 2007. 27: 527–538. [PubMed] [Google Scholar] 61. Ким С., Даллман Х.Г., МакГенри К.С., Марианс К.Дж.Сцепление репликативной полимеразы и геликазы: взаимодействие тау-DnaB опосредует быстрое движение репликационной вилки. Клетка. 1996. 84: 643–650. [PubMed] [Google Scholar] 62. Ким С., Даллманн Х.Г., МакГенри К.С., Марианс К.Дж. Тау защищает бета в комплексе полимеразы ведущей цепи на вилке репликации. J Biol Chem. 1996; 271: 4315–4318. [PubMed] [Google Scholar] 63. Леу Ф.П., Джорджеску Р., О’Доннелл М. Механизм переключения процессивности тау-белка E. coli во время синтеза отстающей цепи. Mol Cell. 2003. 11: 315–327.[PubMed] [Google Scholar] 64. Bunz F, Kobayashi R, Stillman B. кДНК, кодирующие большую субъединицу фактора репликации человека C. Proc Natl Acad Sci (США) 1993; 90: 11014–11018. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 65. Burbelo PD, Utani A, Pan ZQ, Yamada Y. Клонирование большой субъединицы активатора 1 (фактор репликации C) обнаруживает гомологию с бактериальными ДНК-лигазами. Proc Natl Acad Sci (США), 1993; 90: 11543–11547. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 66. Куллманн Дж., Фьен К., Кобаяши Р., Стиллман Б.Характеристика пяти генов фактора репликации C Saccharomyces cerevisiae . Mol Cell Biol. 1995; 15: 4661–4671. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 67. Фотедар Р., Мосси Р., Фитцджеральд П., Руссель Т., Мага Г., Брикнер Н., Мессье Н., Касибхатла С., Хубшер Ю., Фотедар А. Консервативный домен большой субъединицы фактора репликации С связывает PCNA и действует как доминирующий отрицательный ингибитор. репликации ДНК в клетках млекопитающих. EMBO J. 1996; 15: 4423–4433. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 68.Гомес XV, Гэри С.Л., Бургерс П.М. Избыточная продукция в Escherichia coli и характеристика дрожжевого фактора репликации С, лишенного домена гомологии лигазы. J Biol Chem. 2000; 275: 14541–14549. [PubMed] [Google Scholar] 69. Podust VN, Tiwari N, Stephan S, Fanning E. Фактор репликации C отделяется от ядерного антигена пролиферирующих клеток (PCNA) при образовании скользящего зажима, а сам PCNA связывает дельта ДНК-полимеразы с ДНК. J Biol Chem. 1998; 273: 31992–31999. [PubMed] [Google Scholar] 70. Ульманн Ф., Цай Дж., Гиббс Э., О’Доннелл М., Гурвиц Дж.Анализ деления большой субъединицы p140 в человеческом факторе репликации C выявляет области, необходимые для комплексообразования и активности репликации. J Biol Chem. 1997; 272: 10058–10064. [PubMed] [Google Scholar] 71. Гриффитс DJ, Барбет Северная Каролина, Маккриди С., Леманн А.Р., Карр А.М. Делящиеся дрожжи rad17: гомолог RAD24 почкующихся дрожжей, который имеет области сходства последовательностей с дополнительными белками ДНК-полимеразы. EMBO J. 1995; 14: 5812–5823. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 72. Лидалл Д., Вайнерт Т.Гены контрольной точки G2 / M Saccharomyces cerevisiae : дополнительные доказательства роли в репликации и / или репарации ДНК. Mol Gen Genet. 1997; 256: 638–651. [PubMed] [Google Scholar] 73. Паркер А.Е., Ван де Вейер I, Лаус М.С., Верхассельт П., Луйтен WH. Идентификация человеческого гомолога гена контрольной точки Schizosaccharomyces pombe rad17 +. J Biol Chem. 1998; 273: 18340–18346. [PubMed] [Google Scholar] 74. Шимомура Т., Андо С., Мацумото К., Сугимото К. Функциональное и физическое взаимодействие между Rad24 и Rfc5 в путях контрольных точек дрожжей.Mol Cell Biol. 1998. 18: 5485–5491. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 75. Шимада М., Окузаки Д., Танака С., Туган Т., Тамай К.К., Симода С., Нодзима Х. Фактор репликации С3 из Schizosaccharomyces pombe , небольшая субъединица комплекса фактора репликации С, играет роль в контрольных точках как репликации, так и повреждения. Mol Biol Cell. 1999; 10: 3991–4003. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 76. Грин CM, Erdjument-Bromage H, Tempst P, Lowndes NF. Новый белковый комплекс контрольной точки Rad24, тесно связанный с фактором репликации C.Curr Biol. 2000; 10: 39–42. [PubMed] [Google Scholar] 77. Линдси-Больц Л.А., Бермудес В.П., Гурвиц Дж., Санкар А. Очистка и характеристика комплексов Rad контрольной точки повреждения ДНК человека. Proc Natl Acad Sci (США), 2001; 98: 11236–11241. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 78. Ханна Дж. С., Кролл Е. С., Лундблад В., Спенсер Ф. А.. Saccharomyces cerevisiae CTF18 и CTF4 необходимы для сцепления сестринских хроматид. Mol Cell Biol. 2001; 21: 3144–3158. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 79.Mayer ML, Gygi SP, Aebersold R, Hieter P. Идентификация RFC (Ctf18p, Ctf8p, Dcc1p): альтернативного комплекса RFC, необходимого для сцепления сестринских хроматид в S. cerevisiae . Mol Cell. 2001; 7: 959–970. [PubMed] [Google Scholar] 80. Наики Т., Кондо Т., Накада Д., Мацумото К., Сугимото К. Chl12 (Ctf18) образует новый комплекс, связанный с фактором репликации C, и функционирует избыточно с Rad24 в пути контрольной точки репликации ДНК. Mol Cell Biol. 2001; 21: 5838–5845. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 81.Kanellis P, Agyei R, Durocher D. Elg1 образует альтернативный PCNA-взаимодействующий комплекс RFC, необходимый для поддержания стабильности генома. Curr Biol. 2003; 13: 1583–1595. [PubMed] [Google Scholar] 82. Беллауи М., Чанг М., Оу Дж, Сюй Х., Бун С., Браун Г.В. Elg1 образует альтернативный комплекс RFC, важный для репликации ДНК и целостности генома. EMBO J. 2003; 22: 4304–4313. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 83. Ben-Aroya S, Koren A, Liefshitz B, Steinlauf R, Kupiec M. ELG1, дрожжевой ген, необходимый для стабильности генома, образует комплекс, связанный с фактором репликации C.Proc Natl Acad Sci (США), 2003; 100: 9906–9911. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 84. Майка Дж., Бургерс PM. Семейства зажимов и загрузчиков зажимов для ДНК PCNA-RFC. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol. 2004; 78: 227–260. [PubMed] [Google Scholar] 85. Parrilla-Castellar ER, Arlander SJ, Karnitz L. Наберите 9-1-1 для выявления повреждения ДНК: зажимной комплекс Rad9-Hus1-Rad1 (9-1-1). Ремонт ДНК (Amst) 2004; 3: 1009–1014. [PubMed] [Google Scholar] 86. Бермудес В.П., Линдси-Больц Л.А., Чезаре А.Дж., Манива Ю., Гриффит Дж. Д., Гурвиц Дж., Санкар А.Загрузка комплекса контрольных точек человека 9-1-1 на ДНК с помощью комплекса hRad17-фактор репликации C загрузчика контрольных точек in vitro. Proc Natl Acad Sci (США) 2003; 100: 1633–1638. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 87. Майка Дж., Бургерс PM. Дрожжи Rad17 / Mec3 / Ddc1: скользящий зажим для контрольной точки повреждения ДНК. Proc Natl Acad Sci (США), 2003; 100: 2249–2254. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 88. Yao NY, Johnson A, Bowman GD, Kuriyan J, O’Donnell M. Механизм открытия зажима ядерного антигена пролиферирующих клеток фактором репликации C.J Biol Chem. 2006; 281: 17528–17539. [PubMed] [Google Scholar] 89. Цзоу Л., Лю Д., Элледж С.Дж. Репликация, опосредованная белком А, привлечение и активация комплексов Rad17. Proc Natl Acad Sci (США), 2003; 100: 13827–13832. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 90. Майка Дж., Бинц С.К., Уолд М.С., Бургерс П.М. Белок репликации A направляет нагрузку зажима контрольной точки повреждения ДНК на соединения 5′-ДНК. J Biol Chem. 2006. 281: 27855–27861. [PubMed] [Google Scholar] 91. Эллисон В., Стиллман Б. Биохимическая характеристика комплексов контрольных точек повреждения ДНК: зажим-загрузчик и зажим-комплексы со специфичностью для 5′-утопленной ДНК.PLoS Biol. 2003; 1: Е33. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 92. Ниида Х., Наканиши М. Контрольные точки повреждения ДНК у млекопитающих. Мутагенез. 2006; 21: 3–9. [PubMed] [Google Scholar] 93. Санкар А., Линдси-Больц Л.А., Унсал-Качмаз К., Линн С. Молекулярные механизмы репарации ДНК млекопитающих и контрольные точки повреждения ДНК. Анну Рев Биохим. 2004. 73: 39–85. [PubMed] [Google Scholar] 94. Кай М, Ван Т. Контрольные точки реакции на остановку репликации: индуцирование толерантности и предотвращение мутагенеза. Mutat Res. 2003; 532: 59–73.[PubMed] [Google Scholar] 95. Майка Дж., Бургерс PM. Зажатие киназы контрольной точки Mec1 / ATR в действие. Клеточный цикл. 2007. 6: 1157–1160. [PubMed] [Google Scholar] 96. Делакруа С., Вагнер Дж. М., Кобаяши М., Ямамото К., Карниц Л. М.. Зажим Rad9-Hus1-Rad1 (9-1-1) активирует сигнализацию контрольной точки через TopBP1. Genes Dev. 2007; 21: 1472–1477. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 97. Ли Дж., Кумагай А., Данфи WG. Зажим контрольной точки Rad9-Hus1-Rad1 регулирует взаимодействие TopBP1 с ATR. J Biol Chem. 2007; 282: 28036–28044.[PubMed] [Google Scholar] 98. Майка Дж., Недзела-Майка А, Burgers PM. Зажим контрольной точки активирует киназу Mec1 во время инициации контрольной точки повреждения ДНК. Mol Cell. 2006; 24: 891–901. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 99. Bermudez VP, Maniwa Y, Tappin I, Ozato K, Yokomori K, Hurwitz J. Альтернативный комплекс Ctf18-Dcc1-Ctf8-фактор репликации C, необходимый для слипания сестринских хроматид, загружает ядерный антиген пролиферирующих клеток на ДНК. Proc Natl Acad Sci (США), 2003; 100: 10237–10242. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 100.Bylund GO, Burgers PM. Репликационный белок А-направленная разгрузка PCNA комплексом установления когезии Ctf18. Mol Cell Biol. 2005; 25: 5445–5455. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 101. Shiomi Y, Shinozaki A, Sugimoto K, Usukura J, Obuse C, Tsurimoto T. Восстановленный человеческий комплекс Chl12-RFC функционирует как второй загрузчик PCNA. Гены Клетки. 2004; 9: 279–290. [PubMed] [Google Scholar] 102. Ароя С.Б., Купец М. С-подобный комплекс фактора репликации Elg1: новый страж стабильности генома.Ремонт ДНК (Amst) 2005; 4: 409–417. [PubMed] [Google Scholar] 103. Банерджи С., Сикдар Н., Мюнг К. Подавление грубых хромосомных перестроек с помощью нового альтернативного комплекса фактора репликации С. Biochem Biophys Res Commun. 2007; 362: 546–549. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 104. Мията Т., Ояма Т., Маянаги К., Ишино С., Ишино Ю., Морикава К. Комплекс с зажимом для процессивной репликации ДНК. Nat Struct Mol Biol. 2004. 11: 632–636. [PubMed] [Google Scholar] 105. Мията Т., Сузуки Х., Ояма Т., Маянаги К., Ишино Ю., Морикава К.Структура открытого зажима в комплексе зажим-нагружение визуализирована с помощью анализа изображений с помощью электронного микроскопа. Proc Natl Acad Sci (США) 2005; 102: 13795–13800. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 106. Нактинис В., Онраст Р., Фанг Ф., О’Доннелл М. Сборка машины для репликации хромосом: две ДНК-полимеразы, зажим-загрузчик и скользящие зажимы в одной холоферментной частице. II. Промежуточный комплекс между зажимом погрузчика и его зажимом. J Biol Chem. 1995; 270: 13358–13365. [PubMed] [Google Scholar] 107.Нактинис В., Тернер Дж., О’Доннелл М. Молекулярный переключатель в репликационной машине, определяемый внутренней конкуренцией за белковые кольца. Клетка. 1996. 84: 137–145. [PubMed] [Google Scholar] 108. Лей Ф.П., О’Доннелл М. Взаимодействие субъединиц загрузчика зажима в раскрытии бета-скользящего зажима холофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli . J Biol Chem. 2001; 276: 47185–47194. [PubMed] [Google Scholar] 109. Гомес XV, Бургерс PM. Утилизация АТФ дрожжевым фактором репликации С. I. АТФ-опосредованное взаимодействие с ДНК и ядерным антигеном пролиферирующих клеток.J Biol Chem. 2001; 276: 34768–34775. [PubMed] [Google Scholar] 110. Kazmirski SL, Zhao Y, Bowman GD, O’Donnell M, Kuriyan J. Движения вне плоскости в открытых скользящих зажимах: моделирование молекулярной динамики ядерного антигена эукариотических и архейных пролиферирующих клеток. Proc Natl Acad Sci (США) 2005; 102: 13801–13806. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 111. Bowman GD, Goedken ER, Kazmirski SL, O’Donnell M, Kuriyan J. Загрузчики зажимов ДНК-полимеразы и распознавание ДНК. FEBS Lett. 2005; 579: 863–867. [PubMed] [Google Scholar] 112.Цучихаши З., Корнберг А. Взаимодействия АТФ τ- и γ-субъединиц холофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli . J Biol Chem. 1989; 264: 17790–17795. [PubMed] [Google Scholar] 113. Уокер Дж. Р., Хервас С., Росс Дж. Д., Блинкова А., Уолбридж М. Дж., Пумарега Е. Дж., Парк МО, Нили HR. Escherichia coli Консервативные остатки тау- и гамма-субъединиц ДНК-полимеразы III, необходимые для активности in vivo и in vitro. J Bacteriol. 2000. 182: 6106–6113. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 114.Цуримото Т., Стиллман Б. Факторы репликации, необходимые для репликации ДНК SV40 in vitro . I. Специфическое для структуры ДНК распознавание соединения праймер-матрица эукариотическими ДНК-полимеразами и их вспомогательными белками. J Biol Chem. 1991; 266: 1950–1960. [PubMed] [Google Scholar] 115. Герик К.Дж., Гэри С.Л., Бургерс П.М. Избыточное производство и аффинная очистка фактора репликации Saccharomyces cerevisiae C. J. Biol Chem. 1997. 272: 1256–1262. [PubMed] [Google Scholar] 116. Хингорани М.М., О’Доннелл М.Связывание АТФ с зажимом-загрузчиком Escherichia coli приводит к открытию кольцевого зажима холофермента ДНК-полимеразы III. J Biol Chem. 1998. 273: 24550–24563. [PubMed] [Google Scholar] 117. Тернер Дж., Хингорани М.М., Келман З., О’Доннелл М. Внутренняя работа машины с зажимом для ДНК-полимеразы. EMBO J. 1999; 18: 771–783. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 118. Гомес XV, Шмидт С.Л., Бургерс П.М. Утилизация АТФ дрожжевым фактором репликации C. II. Чтобы загрузить ядерный антиген пролиферирующих клеток на примированную ДНК, требуется несколько этапов связывания АТФ.J Biol Chem. 2001; 276: 34776–34783. [PubMed] [Google Scholar] 119. Джонсон А., О’Доннелл М. Заказанный гидролиз АТФ в машине AAA + с зажимом гамма-комплекса. J Biol Chem. 2003; 278: 14406–14413. [PubMed] [Google Scholar] 120. Johnson A, Yao NY, Bowman GD, Kuriyan J, O’Donnell M. Загрузчик зажима фактора репликации C требует датчиков пальца аргинина для управления связыванием ДНК и загрузкой ядерного антигена пролиферирующих клеток. J Biol Chem. 2006; 281: 35531–35543. [PubMed] [Google Scholar] 121. Чжуанг З., Йодер Б.Л., Бургерс П.М., Бенкович С.Дж.Структура комплекса ядерного антигена с фактором репликации C с раскрытым кольцом пролиферирующих клеток, выявленная с помощью передачи энергии флуоресценции. Proc Natl Acad Sci (США), 2006; 103: 2546–2551. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 122. Бертрам Дж. Г., Блум Л. Б., Тернер Дж., О’Доннелл М., Бичем Дж. М., Гудман М. Ф. Предварительный анализ сборки кольцевых зажимов дикого типа и мутантных кольцевых зажимов Escherichia coli ДНК-полимеразы III на ДНК. J Biol Chem. 1998. 273: 24564–24574. [PubMed] [Google Scholar] 123.Хингорани М. М., Блум Л. Б., Гудман М. Ф., О’Доннелл М. Разделение труда — последовательный гидролиз АТФ управляет сборкой скользящего зажима ДНК-полимеразы вокруг ДНК. EMBO J. 1999; 18: 5131–5144. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 124. Sexton DJ, Kaboord BF, Berdis AJ, Carver TE, Benkovic SJ. Анализ порядка сборки холофермента ДНК-полимеразы бактериофага Т4. Биохимия. 1998; 37 [PubMed] [Google Scholar] 125. Тракселис М.А., Аллея СК, Абель-Сантос Э., Бенкович С.Ю. Создание динамического изображения скользящего зажима во время сборки холофермента ДНК-полимеразы Т4 с помощью резонансного переноса энергии флуоресценции.Proc Natl Acad Sci (США), 2001; 98: 8368–8375. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 126. Пьетрони П., фон Хиппель PH. Множественное связывание АТФ требуется для стабилизации «активированного» (зажим открытого) зажимного загрузчика комплекса репликации ДНК Т4. J Biol Chem. 2008. 283: 28338–28353. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 127. Пьетрони П., Янг М.С., Латам Г.Дж., фон Хиппель PH. Рассечение АТФ-управляемого реакционного цикла системы загрузки зажима процессивности репликации ДНК бактериофага Т4. J Mol Biol.2001; 309: 869–891. [PubMed] [Google Scholar] 128. Бертрам Дж. Г., Блум Л. Б., Хингорани М. М., Бичем Дж. М., О’Доннелл М., Гудман М. Ф. Молекулярный механизм и энергетика сборки зажима у Escherichia coli. Роль гидролиза АТФ, когда комплекс γ загружает β на ДНК. J Biol Chem. 2000; 275: 28413–28420. [PubMed] [Google Scholar] 129. Хингорани ММ, Коман ММ. О специфичности взаимодействия между фиксирующим фактором репликации Saccharomyces cerevisiae Clamp-loader и примированными матрицами ДНК во время репликации ДНК.J Biol Chem. 2002; 277: 47213–47224. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 130. Асон Б., Бертрам Дж. Г., Хингорани М. М., Бичем Дж. М., О’Доннелл М., Гудман М. Ф., Блум Л. Б. Модель для сборки голофермента ДНК-полимеразы III Escherichia coli на концах праймера / матрицы: ДНК запускает изменение специфичности связывания зажимного загрузчика γ-комплекса. J Biol Chem. 2000; 275: 3006–3015. [PubMed] [Google Scholar] 131. Асон Б., Хандаяни Р., Уильямс С. Р., Бертрам Дж. Г., Хингорани М. М., О’Доннелл М., Гудман М. Ф., Блум Л. Б.Механизм загрузки скользящего зажима ДНК-полимеразы III бета Escherichia coli на ДНК. Добросовестный праймер / шаблоны предпочтительно запускают гамма-комплекс для гидролиза АТФ и нагрузки зажима. J Biol Chem. 2003; 278: 10033–10040. [PubMed] [Google Scholar] 132. Гловер Б.П., МакГенри К.С. Холофермент ДНК-полимераза III: асимметричный димерный репликативный комплекс с полимеразами ведущей и отстающей цепи. Клетка. 2001; 105: 925–934. [PubMed] [Google Scholar] 133. Йохансон К.О., МакГенри К.С. Аденозин-5′-O- (3-тиотрифосфат) может поддерживать образование инициирующего комплекса между холоферментом ДНК-полимеразы III и примированной ДНК.J Biol Chem. 1984; 259: 4589–4595. [PubMed] [Google Scholar] 134. Ahmadian MR, Stege P, Scheffzek K, Wittinghofer A. Подтверждение гипотезы аргининового пальца для GAP-стимулированной реакции GTP-гидролиза Ras. Nat Struct Biol. 1997. 4: 686–689. [PubMed] [Google Scholar] 135. Снайдер А. К., Уильямс С. Р., Джонсон А., О’Доннелл М., Блум Л. Б. Механизм загрузки скользящего зажима ДНК-полимеразы III Escherichia coli : II. Разъединение β- и ДНК-связывающих активностей γ-комплекса. J Biol Chem.2004. 279: 4386–4393. [PubMed] [Google Scholar]pewag peclamp — Подъемные зажимы
Информация о пользователе
Информация для пользователя по использованию, хранению, проверке и техническому обслуживанию предохранительных подъемных хомутов pewag
Общая информация
Подъемные хомуты pewag могут использоваться для общего подъема и совместимы с широким диапазоном конструкций, нагрузок и приспособлений. Пожалуйста, смотрите наш каталог для получения информации о конструкции и грузоподъемности.Различные подъемные зажимы предназначены для конкретных областей применения, поэтому важно, чтобы пользователи были осведомлены обо всех условиях эксплуатации. Пожалуйста, свяжитесь с нашей службой технической поддержки в случае возникновения проблем или вопросов. Подъемные зажимы pewag могут использоваться только квалифицированным специалистом. При правильном использовании подъемные цепи pewag имеют долгий срок службы и обеспечивают высокий уровень безопасности. Материальный или личный ущерб можно предотвратить только при правильном использовании подъемных зажимов. Чтение и понимание нашей пользовательской информации является важным условием для использования наших подъемных зажимов, но никогда не может заменить ответственное, бережное отношение ко всем процессам подъема
.
Изменения в состоянии при поставке
Исходное состояние подъемного зажима pewag не должно быть изменено. Не снимайте
какие-либо детали с зажимов (например, болты, предохранительные штифты
, пружины и т. Д.) Обработка поверхности, такая как горячее цинкование и гальваническое цинкование, не подходит для подъемных зажимов pewag.Химическая очистка или очистка на основе щелочи также являются опасными процессами, которые необходимо обсудить с pewag заранее. Если у вас возникнут вопросы, обратитесь в нашу техническую службу.
Использование подъемных зажимов pewag
Всегда читайте инструкции перед использованием подъемных зажимов pewag. Наши стандартные подъемные зажимы подходят для подъема и транспортировки стальных листов с максимальной твердостью 37 HrC (345 HB). Для материалов с твердостью до 50 HrC (485 HB) мы поставляем зажимы с дополнительной закалкой зубчатого кольца и сегмента зуба — см. Модель «Extra-Hard» (H).Наши стандартные подъемные зажимы имеют минимальную грузоподъемность 10% от максимальной грузоподъемности, указанной на корпусе зажима.
Для веса ниже 10% предела максимальной грузоподъемности мы рекомендуем зажимы VJPW и VJPUW без предела минимальной грузоподъемности. Никогда не перегружайте хомут и следите за тем, чтобы грузы не поднимались внезапно или хомут не наталкивался на препятствие.
Всегда используйте всю глубину захвата зажима. Никогда не поднимайте более одной пластины за раз, за исключением моделей, которые предназначены для подъема нескольких пластин (например, модели HSKW).Всегда соблюдайте безопасное расстояние при подъеме или опускании груза и не позволяйте никому стоять под грузом.
Подъемные хомуты pewag должны храниться чистыми, высушенными и защищенными от коррозии
Преимущества и информация о системе подъемных зажимов pewag
- Производство опирается на современное оборудование, которое работает в соответствии с неизменно высокими стандартами
- Инновации находятся в центре процесса разработки и производства подъемных хомутов pewag
- Мы постоянно совершенствуем нашу продукцию и всегда стремимся к поиску новых решения
- Удобное и безопасное приложение — ключ к успеху
- Широкий ассортимент продукции для множества приложений
Дизайн
- Легкий, обтекаемый дизайн для простоты использования
- Простота обслуживания
- Высокая устойчивость и длительный срок службы благодаря премиум- качественная сталь
- Соответствие всем стандартам и нормам, таким как европейский стандарт EN 13155, австралийский стандарт 4991, североамериканский стандарт ASME B30.